【摘 要】
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目的 建立一种快速准确测定培养细胞上清、脐带血干细胞定向诱导后细胞及上清、大鼠血清及脑组织中单胺类神经递质左旋多巴(L-DOPA)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、多
【机 构】
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首都医科大学神经科学研究所,北京市神经再生修复重点实验室,北京100069
【出 处】
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中国神经科学学会第四次会员代表大会暨第七届全国学术会议(The 7th Biennial Meeting and the
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目的 建立一种快速准确测定培养细胞上清、脐带血干细胞定向诱导后细胞及上清、大鼠血清及脑组织中单胺类神经递质左旋多巴(L-DOPA)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、多巴柯(DOPAC)、多巴胺(DA)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、高香草酸(HVA)、及5-羟色胺(5-HT)含量的高效液相色谱-电化学检测方法.并且使8种物质在同一流动相、同一柱子、同一流速等情况下达到良好的分离效果.方法 泵的型号为:ESA Model 582 Pump,检测器为:ESA Model coulochem Ⅲ:石墨碳电极、参比电极为金属板.采用ESA C18柱,柱型150 mm×3.2 mm,柱颗粒3 μm;经反复实验摸索,能达到较好的分离效果,且8种物质分离时间间隔较均匀,并总时间较短的流动相配方为:缓冲液(0.05M柠檬酸、0.05无水乙酸钠、0.0005M辛烷基磺酸钠、0.0005M乙二胺四乙酸二钠、1.325%三乙胺及适度甲醇),流动相流速0.4ml/min.结果 以上8种物质平均保留时间分别为2.60分、3.83分、5.42分、7.81分、10.62分、14.62分、20.33分、29.05分.另外流动相中8辛烷基磺酸钠和甲醇的浓度对分离时间和效果影响较大,应严格控制.
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