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近年来,许多生物技术药专利陆续到期,国内外掀起了生物类似药物的研发热潮,如何对这些生物类似药进行有效的质量可比性研究显得尤为重要。相对于小分子药物,抗体及相关生物治疗药物分子量大,功能域多,如何界定类似药和参比药的一致性标准对于产品质量放行和头对头的研究是一个值得探讨的问题。本研究以结构复杂的重组人肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白为材料,依照FDA生物类似药指南进行可比性研究。实验选取原研药(RBP)及国内3个类似药或衍生物(SBP)作为实验材料,首先在蛋白一级结构、二级结构、唾液酸修饰、蛋白纯度、电荷异质性等方面进行了结构表征分析,其次在细胞毒中和活性、结合活性等方面进行了功能分析,最后还进行了药代动力学的初步比较,以期对大分子生物类似药的质量可比性研究提供参考和数据支持。在进行结构表征研究时,首先对氨基酸序列进行了鉴定,和RBP相比,SBP分为三类:SBP1与RBP序列一致;SBP2在TNFR段67/70位发生突变;SBP3在Fc段376/378位发生突变。二级结构比较时,各SBP与RBP无显著差异。SBP1、SBP2与SBP3的唾液酸含量均低于RBP。功能相关分析结果显示:SBP1的体外细胞毒中和活性、TNF-α亲和力与体内半衰期均与RBP无显著差别;SBP2的3种功能均显著高于RBP;对于SBP3,虽然在Fc段发生氨基酸突变,但细胞毒中和活性、亲和力与体内半衰期与RBP无显著差别。因此,SBP1应该可以被定义为生物类似药,SBP2在一定程度上可以被定义为一种新药;而SBP3由于氨基酸序列与RBP不同,按照EMA的标准,应该是新药,然而本实验的结果显示,除氨基酸序列差异外,SBP3在功能上与RBP并无显著差别,该产品在国内上市是否可以作为生物类似药还有待于非临床与临床实验的进一步研究。通过TNFR:Fc融合蛋白国内类似药与原研药比较,初步进行了该制品的质量可比性研究,建立了相关的分析方法和评价手段,探讨了在保证产品安全有效质量可控的前提下,产品存在非关键质量属性差异时是否可以列为生物类似药的问题。