【摘 要】
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目的：通过克隆EV71病毒结构前体蛋白p1和非结构蛋白3CD,构建共表达P1前体蛋白和非结构蛋白3CD的真核双基因表达载体.方法：设计合成EMCV病毒IRES序列的特异性引物,克隆至真核表达载体pcDNA3.0上,命名为pc-IRES.从手足口病重症患者分离EV71病毒株,经RT-PCR技术分别扩增出EV71病毒的P1前体蛋白区与3CD区的片段,并将其定向克隆至真核表达载体pc-IRES载体中IR
【机 构】
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深圳市疾病预防控制中心,518055 深圳市罗湖区疾病预防控制中心,518020
【出 处】
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第三届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛
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目的：通过克隆EV71病毒结构前体蛋白p1和非结构蛋白3CD,构建共表达P1前体蛋白和非结构蛋白3CD的真核双基因表达载体.方法：设计合成EMCV病毒IRES序列的特异性引物,克隆至真核表达载体pcDNA3.0上,命名为pc-IRES.从手足口病重症患者分离EV71病毒株,经RT-PCR技术分别扩增出EV71病毒的P1前体蛋白区与3CD区的片段,并将其定向克隆至真核表达载体pc-IRES载体中IRES序列的上游和下游,随后转化到大肠杆菌DH5α中,最后经PCR和双酶切鉴定转化菌落.结果：重组真核双基因表达载体p-IRES-P1-3CD构建成功.结论：成功构建共表达EV71病毒P1前体蛋白(VP1-VP4)和非结构蛋白3CD真核双基因表达载体,这将为下一步制备基于DNA载体的EV71病毒的类病毒颗粒(VLPs)疫苗打下基础.
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目的：探讨兰州地区2006-2011六年间女性生殖道支原体感染及其耐药性变化,为临床合理用药提供依据.方法：采用液体培养法检测支原体及其对12种抗菌药物的药敏试验.结果：2006-2011年支原体检出率分别为52.5％、58.5％、 46.9％、51.0％、47.9％、52.7％.单一Uu感染比例最高(96.3％-65.0％),其次为Uu、 Mh混合感染,且所占比例逐年上升(2.2％-34.0％)
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目的：从就诊于甘肃省兰州市肺科医院的痰标本中筛查结核分枝杆菌利福平依赖菌株。初步研究利福平依赖菌株表型的变异，研究其致病机制，为依赖利福平菌株引起的结核病的诊断和防治提供新思路。方法：将甘肃省兰州市肺科医院检验科筛查的4例结核分枝杆菌利福平依赖株，接种于含与不含利福平的罗氏培养基进行传代培养，观察培养基中菌落生长情况，采用萋尔-纳尔逊(Ziehl-Neelsen)抗酸染色法对罗氏培养基有菌落生长的
目的：了解2008-2010年甘肃省人民医院烧伤科住院患者各类感染标本中耐甲氧西林葡萄球菌分布及耐药状况.方法：常规方法从烧伤创面、血液、痰液、肺泡灌洗液等标本中分离、鉴定细菌；纸片琼脂扩散法(Kirby-Bauer)对临床常用的15种抗菌药物进行细菌耐药性检测；监测数据采用WHONET-5.5软件统计分析；利用PCR方法对其中的40株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌进行SCCmec基因分型；利用脉冲场凝
目的：了解本院2007-2011五年来常见病原菌的分布及细菌耐药性情况.方法：2007--2011年住院病人病原学检查结果统计，病原菌的分布及其对抗菌素的耐药性.结果：革兰氏阴性杆菌以大肠埃希氏杆菌和克雷伯氏杆菌为主，占总感染病原菌的34.5％；革兰氏阳性球菌以肠球菌和葡萄球菌为主，占总感染病原菌的18.2％；假单胞菌感染占总感染病原菌的11.5％；真菌占总感染病原菌的21.1％.这些菌株对抗生素
目的：了解铜绿假单胞菌各病区分布情况及耐药性变迁,预防和控制院内感染的发生,减缓耐药菌株的出现,延长现有抗生素的使用期限.结果：临床分离铜绿假单胞菌103株,38株来自呼吸科,81株来自痰标本,产金属酶的有7株,占分离菌株的6.8％,其中4株分离自神经外科昏迷伴器官切开的患者痰液中,3株分离自ICU病房.结论：我院分离的铜绿假单胞菌科室以呼吸科居多,标本类型以痰居多；耐亚胺培南的铜绿假单胞菌对许多
目的：通过细菌耐药性检测,调查甘肃省肿瘤医院近两年来临床分离病原菌的分布与耐药现状,为临床合理选用抗菌药物治疗感染性疾病提供参考依据.方法：药敏试验采用纸片扩散法(K-B法),并对肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株、葡萄球菌属甲氧西林耐药株进行分别检测,依据CLSI2009年标准判断检测结果,数据用上海新和实验室管理软件进行分析.结果：2010年1月～2011年12月我院共分离出病
目的：探讨噬菌体生物扩增法在支气管肺泡灌洗液结核分枝杆菌检测中的应用价值.方法：应用噬菌体生物扩增法和改良罗氏培养法共同检测30例支气管肺泡灌洗液标本,通过比较分析,对噬菌体生物扩增法检测支气管肺泡灌洗液中结核分枝杆菌的应用进行初步评价.结果：30例支气管肺泡灌洗液标本中,噬菌体生物扩增法检出阳性5例(16.67％),改良罗氏培养法检出阳性5例(16.67％),两种方法均阳性4例(13.33％)；
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