【摘 要】
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目的 应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术观察不同死亡原因下大鼠心肌内多种RNA含量随死亡时间(postmortem interval,PMI)的降解规律。方法 构建断颈死、窒息死和失血性休
【机 构】
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复旦大学上海医学院法医学系,上海200032
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目的 应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术观察不同死亡原因下大鼠心肌内多种RNA含量随死亡时间(postmortem interval,PMI)的降解规律。方法 构建断颈死、窒息死和失血性休克死大鼠模型,尸体保存于室温(25±2℃)的环境下；于死后不同时间提取心肌中总RNA,利用qRT-PCR技术检测U6 SnRNA及GAPDH、β-actin、HIF-1、iNOS、TNF-α和IL-6 mRNA的循环阈值(threshold cycle,Ct),观察相对表达量随PMI的变化情况。结果 U6非常稳定,受死亡原因和死亡时间的影响较小,可用作内对照；当PMI≤24h时,GAPDH、HIF-1、iNOS、TNF-α和IL-6的表达量随死因呈现出不同的增高趋势,而β-actin皆呈下降趋势；当36≤PMI≤96h时,各mRNA的表达量皆随PMI的延长持续下降。结论 在死亡早期,死亡大鼠心肌组织中GAPDH、HIF-1、iNOS、TNF-α和IL-6的表达量由于死因的不同而呈现特征性的增高变化；此后各mRNA随PMI延长不断降解,表达量持续降低。死后各RNA表达量的特征性变化可为不同死因下的死亡时间推断提供一定的参考。
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