目的：利用聚合酶链反应(PCR)定点突变技术构建含人类ABL基因第6号外显子片段的野生型及含T315I突变型重组质粒,作为检测ABL T315I基因突变的阳性对照和阴性对照标准品。方法：先设计包括突变位点的两对引物,以健康人外周血基因组DNA为模板,扩增获得野生型和突变型ABL基因第6号外显子片段,将其插入pSG5M-flag载体质粒中,并将所获重组质粒分别进行酶切与测序鉴定,通过紫外分光光度计检测标本的浓度和纯度。结果：DNA测序表明在预期位点上发生突变,ABL基因第315位氨基酸密码子由苏氨酸(Thr)残基突变为异亮氨酸(Ile)残基,所构建ABL基因野生型和突变型质粒,经酶切和测序鉴定与目的片段完全一致。结论：PCR技术诱导定点突变准确、高效。所构建含野生型和T315I突变的ABL基因重组质粒,可作为检测ABL基因T315I突变提供阴性和阳性对照以及质控品,同时也为T315I突变的相关研究奠定了基础。