【摘 要】
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目的 检测G蛋白偶联受体激酶6(G protein-coupled receptor kinase 6,GRK6)在7种多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞系、MM患者以及正常入骨髓细胞中的表达情况；构建
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目的 检测G蛋白偶联受体激酶6(G protein-coupled receptor kinase 6,GRK6)在7种多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞系、MM患者以及正常入骨髓细胞中的表达情况；构建靶向干扰GRK6基因表达的慢病毒载体,并获得稳定沉默GRK6的人多发性骨髓瘤细胞系；体外观察GRK6基因沉默对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡等生物学行为的影响,并探讨其可能机制,为多发性骨髓瘤基因靶向治疗提供实验和理论依据。方法 (1) Trizol法从MM细胞系(MM1R、NCI-H929、RPMI8226、U266、IM9、MM1S及OPM2),16例初诊MM患者以及11例健康志愿者的骨髓标本中提取总RNA,通过逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)及实时定量PCR (real time quantitative polymerase chain reaction,Q-PCR)检测GRK6 mRNA表达情况,并通过相对定量公式2-△△Ct计算出其相对表达水平,Western Blot检测GRK6蛋白表达。
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