人源单核细胞系28SC体外热原检测体系的建立

来源 :第二届(2016年)中国安全药理学学术年会暨第五届安全药理学国际学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jimmyreagan
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  目的:研究人源单核细胞系28SC体外检测热原的可行性.方法:用28SC模拟人体,将其分别与空白对照(IMDM)、各类热原[革兰氏阴性菌(LPS);革兰氏阳性菌(LTA);真菌(Zysoman)]共同孵育孵育,以酶联免疫分析(ELISA)法检测孵育体系中相关细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)的含量变化.活化物calcitriol对28SC孵育体系检测热原的影响,建立28SC热原检测体系;考察28SC体外检测热原体系最低检测限以及线性范围.结果及结论:活化物calcitriol浓度为100ng/ml浓度时,28SC-IL-1β、TNF-α法对LPS可检测到0.5EU/ml,对LTA和Zymosan无反应,28SC-IL-6法对LPS可检测到0.25EU/ml,对LTA可检测到0.5μg/ml,对Zymosan可检测到16.0μg/ml,确定28SC热原检测体系的活化物calcitriol浓度为100ng/ml,检测指标为细胞因子IL-6;LPS (0.015、0.031、0.0625、0.125、0.25、0.5 EU/ml)刺激活化后的28SC细胞,以IL-6为检测指标,该体系对LPS的最低检测限可达到0.031EU/ml,线性范围为0~0.5EU/ml,R=0.9884.
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