IFN-τ调节奶牛子宫上皮细胞BoLA-Ⅰ的表达

来源 :中国畜牧兽医学会家畜内科学会2014年学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:blackcat
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  不孕是制约畜牧业生产的主要问题,围植入期着床不稳定或失败是造成动物不孕的主要原因.而着床失败主要与妊娠识别、子宫容受态形成、合子基因突变等有关.IFN-τ是由反刍动物胚胎滋养层细胞分泌的,具有Ⅰ型干扰素的一般功能,其受体在子宫上皮细胞上.IFN-τ是反刍动物妊娠识别的信号分子,但是其具体调节机制尚不明确.BoLA-Ⅰ的表达情况,决定了在妊娠过程中胎儿作为一种同种异体抗原是否会被母体接受而不出现免疫排斥.本研究旨在通过研究IFN-τ,BoLA-Ⅰ及奶牛子宫上皮细胞的免疫调节通路和功能研究进一步认识奶牛子宫容受态形成和着床机制,提升解决动物不孕的科学思想和方法.本试验运用细胞培养方法培养奶牛子宫上皮细胞,建立奶牛子宫内膜上皮细胞体外表达模型,用外源性的IFN-τ的干预,设计不同时间浓度梯度.采用实时荧光定量PCR的方法检测IFN-τ对奶牛子宫上皮细胞BoLA-Ⅰ中典型的BoLA-A,Heavy chain,BoLA-N* 03101,BoLA-N* 03701,BoLA-N* 01201,A11以及非典型的MIC1,BoLA-NC1*,BoLA-NC3*基因表达的影响.进一步筛选出干预结果显著的BoLA-A,Heavy chain,MIC1,制备多克隆抗体,用Western blot的方法检测其蛋白表达在于预下的调节情况.结果显示,MIC1,BoLA-A,Heavy chain,BoLA-N* 01201,IFN-τ对其表达上调作用很明显,BoLA-NC1*,BoLA-NC3*,A11,有上调,作用不明显,时间浓度关联性不大,BoLA-N* 03101,BoLA-N* 03701几乎没有影响.运用Western blot的方法检测其蛋白的表达水平,与定量结果一致.结果提示IFN-τ是通过调控子宫上皮细胞表达BoLA-Ⅰ来调节子宫着床内环境的.
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