【摘 要】
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目的 采用E-test法观察不同的培养基pH值、细菌接种量、培养基琼脂厚度、羊血浓度对临床常用药物敏感试验最低抑菌浓度(MIC值)的影响,建立合理的H.pylori药物敏感试验方
【机 构】
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330006 南昌大学第一附属医院消化科
【出 处】
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The 14th Congress of Gastroenterology China(第十四届全国消化系病学术会议)
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目的 采用E-test法观察不同的培养基pH值、细菌接种量、培养基琼脂厚度、羊血浓度对临床常用药物敏感试验最低抑菌浓度(MIC值)的影响,建立合理的H.pylori药物敏感试验方法.方法 对培养阳性的H.pylori菌株,选取形成单菌落细菌,应用标准菌株NCTC11637作为质控.①不同的培养基pH值：培养基pH值分别为6.0、6.5、7.0和7.5的培养基,细菌接种浓度为1.0麦氏浊度,每个平皿(直径90 mm)含25 mL琼脂；②不同的细菌接种量：校正细菌接种浓度至0.5、1.0、1.5、2.0、2.5麦氏浊度,培养基pH值为7.5的培养基,每个平皿(直径90 mm)含25 mL琼脂；③不同的培养基琼脂厚度：制备血琼脂平板,按每个平皿(直径90 mm)25、12.5 mL进行分装,校正细菌接种浓度至1.0麦氏浊度,培养基pH值为7.5；④不同的羊血浓度：按每个平皿(直径90 mm)25 mL进行分装,培养基pH值为7.5,校正浓度至1.0麦氏浊度,含5％、10％浓度羊血的MH琼脂培养基,分别观察不同的培养条件对临床常用药物敏感试验MIC值的影响.结果 阿莫西林、克拉霉素、阿奇霉素、左氧氟沙星、莫西沙星随着pH降低时MIC值增加,利福平、四环素、呋喃唑酮、甲硝唑随着pH降低时MIC值变化不明显.在细菌接种浓度不同的药敏实验中,临床常用抗生素MIC值随细菌接种浓度值升高而升高.含25 mL琼脂培养基的平皿(直径90 mm)中,MIC值略大于12.5 mL琼脂培养基的平皿.在含5％、10％浓度羊血的MH琼脂培养基中,药物敏感试验MIC值随着羊血浓度的升高而升高.结论 临床常用抗生素对H.pylori的MIC值随琼脂厚度、接种细菌浓度和羊血浓度的增加而升高.某些抗生素在酸性环境下其抗菌活性明显降低.参照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)批准的临床药物敏感试验方法,选取形成单菌落细菌,当pH值为7.0～7.5、细菌接种浓度为1个麦氏浊度单位、每个平皿(直径90 mm)含25 mL琼脂、羊血浓度为5％时,药敏实验结果更加准确可靠.
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