【摘 要】
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甘蓝型油菜作为我国油菜栽培主要品种,对其品质改良的重要性不言而喻。黄籽甘蓝型油菜的油和饼粕中色素含量较褐籽材料低,且木质素、纤维素等抗营养物质的含量低,故其经济价
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甘蓝型油菜作为我国油菜栽培主要品种,对其品质改良的重要性不言而喻。黄籽甘蓝型油菜的油和饼粕中色素含量较褐籽材料低,且木质素、纤维素等抗营养物质的含量低,故其经济价值远大于相同遗传背景的褐籽油菜。类黄酮类物质是植物的一类重要次生代谢产物,其含量与甘蓝型油菜种皮颜色密切相关。本研究前期发现拟南芥透明种皮基因TT12的同源基因在黄籽甘蓝型油菜种子中的表达水平低于褐籽甘蓝型油菜,该基因可编码花青素转运蛋白,控制花青素在液泡中的转运和积累。本研究通过序列比较分析发现BnTT12与十字花科其他物种中的同源序列的保守性较高,且BnTT12在角果和种子中的表达水平高于其它组织。我们基于Crispr/Cas9技术,对BnTT12的两个拷贝设计靶位点构建pRGEB32G-BnTT12载体,用于研究BnTT12对甘蓝型油菜花青素转运的影响。通过农杆菌转化法将pRGEB32GBnTT12敲除载体转化甘蓝型油菜"甲9712",对转化获得的46棵再生植株进行PCR鉴定,共获得28棵阳性植株。通过扩增阳性植株靶位点所在区域片段,并对PCR产物进行测序,发现敲除效率达25%。本实验为后续研究BnTT12对甘蓝型油菜黄籽性状形成的意义奠定了基础。
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