【摘 要】
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目的 探究内源性大麻素系统(ECS)参与肠道屏障调节的具体机制。方法 将根据罗马Ⅲ诊断标准入组的IBS患者作为试验组,在结肠镜检查下钳取结肠各段肠黏膜上皮组织,同时采集
【机 构】
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250012 济南,山东大学齐鲁医院
【出 处】
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The 14th Congress of Gastroenterology China(第十四届全国消化系病学术会议)
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目的 探究内源性大麻素系统(ECS)参与肠道屏障调节的具体机制。方法 将根据罗马Ⅲ诊断标准入组的IBS患者作为试验组,在结肠镜检查下钳取结肠各段肠黏膜上皮组织,同时采集患者自然排出的新鲜粪便样本上清液,分别以免疫组织化学、细胞流式等方法检测上皮组织中大麻素受体的表达变化,采用ELISA技术检测患者血清中AEA/2-AG含量,初步评估ECS活性,并与健康组对照。培养Caco-2和HT-29肠上皮细胞株,分成4组,分别给予ECS激动剂AEA和2-AG,大麻素受体1、大麻素受体2的受体拮抗剂,采用提取的IBS患者肠道菌群上清液孵育,并以拮抗剂+肠道乳酸杆菌活菌株悬液共培养,再用RT-PCR,Western印迹法、细胞流式等分子生物学方法检测肠上皮细胞的大麻素受体和肠上皮细胞间紧密连接蛋白(Occludin,闭锁小带蛋白1)的表达改变,从而观察4组肠上皮细胞屏障功能的变化。结果 IBS患者粪便上清液中大麻素受体表达量低于对照组,血清中AEA/2-AG含量亦降低。离体培养的4组肠上皮细胞中,ECS激动剂处理组的肠上皮屏障功能良好,Occludin、闭锁小带蛋白1表达正常或升高；大麻素受体拮抗剂组和IBS患者肠道菌群上清液孵育组的肠屏障功能被破坏,Occludin、闭锁小带蛋白1表达下降。结论 IBS患者肠黏膜上皮ECS存在功能紊乱,而对于IBS患者肠道内菌群紊乱,可通过影响肠上皮细胞内的ECS来参与调节肠道屏障系统。
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