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目的:优选鹿茸有效成分提取的最佳工艺,确定提取方法、观察鹿茸提取物对实验性心肌损伤的保护作用及并探讨其作用的相关机制。
方法:(1)采用正交试验方法优选确定乙醇回流提取工艺,提取鹿茸提取物。(2)采用结扎左冠状动脉前降支法制备大鼠心肌缺血模型。(3)灌胃给鹿茸提取物(1g·kg-1体重,0.5g·kg-1体重,0.25g·k-1体重),连续给药21天。(4)观察指标:①心电图变化;②心肌梗死面积;③血浆中内皮素(ET)、心钠素(ANP)含量变化;④心肌组织血管内皮细胞生长因子(VEGF)的变化;⑤心肌组织SOD、MDA含量变化;⑥心肌组织细胞凋亡指数(AI)的变化;⑦心肌细胞BCL-2和BAX蛋白表达的变化;⑧心肌组织NO含量的变化;⑨心肌组织降钙素基因相关肽(CGRP)含量的变化。
结果:①A1B2C3D1,即用10倍量70%乙醇,回流提取鹿茸提取物为最佳优选工艺方法。②对大鼠急性心肌缺血中后期心电图ST段偏移程度有明显的纠正作用,并能不同程度的减小心肌梗死面积。③鹿茸提取物可抑制心肌缺血模型动物ET释放,促进ANP的合成,减轻缺血区血管的痉挛性收缩程度;④鹿茸提取物可提高心肌组织细胞中VEGF的含量,有利于缺血区血管的再生和扩展;⑤鹿茸提取物可提高心肌组织SOD含量、降低MDA水平,有利于清除组织超氧阴离子自由基,保护细胞免受损伤;⑥降低心肌组织细胞凋亡指数(AI),上调Bc1-2/Bax比值上升,可抑制或逆转细胞凋亡的发生,从而保护受损心肌。⑦增加NO含量,提高CGRP含量,可通过舒张血管和抑制血小板聚集减轻心肌缺血损伤。
结论:鹿茸提取物对损伤心肌有明显的保护作用,其作用机制可能与调节相关活性物质水平,缺血区血管的痉挛性收缩程度,抑制或逆转心肌细胞凋亡,清除自由基,促进缺血心肌中侧枝循环的建立而改善其缺血等机制有关。