外源性磷酸肌酸抗小鼠运动性疲劳和神经保护作用的研究

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目的:随着职业运动的发展和群众体育活动的增多,运动性疲劳越来越受到各国学者的重视,但是,运动性疲劳的系统性研究主要还是在20世纪70年代后。当今比赛中常用肌酸作为运能能量补剂,肌酸的主要作用是促进磷酸肌酸的合成及刺激肌肉的合成,是能量储存的重要物质,适量补充肌酸可预防或消除运动性疲劳,使运动员在训练和比赛中保持良好的状态具有积极作用。但是长期服用肌酸后,会产生一些副作用,如肌肉僵硬、肌肉酸胀和体重增加。磷酸肌酸(CP)直接用于ATP的再合成,为机体提供能量。磷酸肌酸临床上主要用于心肌梗死、心力衰竭以及各种心脏手术,对心肌缺血有一定的保护作用,还可减少室性心律失常的发生。但是外源性磷酸肌酸在运动中作为能量补剂的作用鲜于见诸报道。本实验以昆明小鼠和小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro2A)为研究对象,在动物整体水平研究外源性磷酸肌酸对缓解小鼠急性力竭运动的抗疲劳作用,以及对缺氧条件下神经细胞的保护作用。方法:(1)雄性昆明小鼠36只,月龄2月,体重22±3g。温度25±2°C,相对湿度50±5%,小鼠分笼饲养,每笼9只,自然光照,自由进食、饮水,小鼠适应性喂养3天后,随即分成三组:A空白对照组12只,B游泳组12只,C给药游泳组12只。A组不运动,自由进食饮水;B组和C组适应性游泳训练3天,水温为28±1°C,游泳训练后,用毛巾擦干并吹风机吹干鼠毛。第7天,B组腹腔注射生理盐水,C组腹腔注射磷酸肌酸(500mg/kg体重),游泳至力竭后断头处死,快速心脏取血、离心;取心脏、股四头肌,于-80°C冰箱冻存。用CK试剂盒、NO试剂盒和NOS试剂盒做生化检测。所有数据采用SPSS11.5统计软件进行统计学处理。(2)收集对数生长期Neuro2A的细胞,用胰酶消化后平铺于96孔板,加入不同浓度的磷酸肌酸保护24小时后,在缺氧环境下缺氧20分钟,噻唑蓝比色法(MTT法)测各孔细胞的存活率。结果:(1)给药(CP)运动组的力竭运动时间明显长于游泳组,游泳组小鼠血清NO、NOS、CK的指标,与空白对照组相比,明显升高(P<0.01),而给药运动组的小鼠血清NO、NOS、CK的指标,与单纯运动组相比,明显下降(P<0.01),但仍高于空白对照组水平。(2)10μmol/ml组Neuro2A细胞存活率显著高于各组。结论:磷酸肌酸钠能明显提高小鼠的运动能力,降低自由基对机体的氧化应激作用,并对缺氧状态下的神经细胞起到保护作用。
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