不同剂量泡球蚴感染所致小鼠肝脏病理变化及其免疫状态的研究

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目的:泡型包虫病(Alveolar Echinococcosis,AE)是由泡球蚴(Ec-hinococcus multilocularis,Em)寄生人体,导致慢性浸润性的肝脏损伤为特点的寄生虫病。(1)通过观察不同感染时间剂量下泡球蚴对小鼠肝脏所造成的病理损伤、病灶数量和类型的变化;(2)评估在不同感染剂量下,泡球蚴对小鼠肝脏造成的损伤程度;(3)检测不同剂量泡球蚴感染条件下CD4+T细胞亚群的变化及炎症因子基因表达,从而分析宿主不同免疫状态下对泡球蚴寄生的影响。方法:(1)给小鼠5种剂量(50psc,250psc,500psc,1000psc,2000psc)泡球蚴达到感染泡球蚴的目的,分别在7个时间段(2周、4周、8周、12周、16周、20周、24周)采集小鼠肝脏标本,制备H E染色片,计算不同时间和剂量下小鼠肝脏病灶数目和类型;(2)选取3种剂量(50psc,500psc,2000psc),3个感染时间段(2周、12周、24周)小鼠的肝脏的切片进行α-SMA,RS,ki67染色,评估肝脏纤维化水平以及淋巴细胞增殖水平;(3)分离肝脏淋巴细胞,检测肝脏区域CD4+T细胞亚群的变化和相关炎性因子基因的表达水平。结果:(1)高剂量(2000psc,1000psc)的泡球蚴产生的病灶数量显著高于低剂量组(P<0.05),病灶数量不会随着感染时间延长而减少,反而会增多。并且,病灶面积大,泡球蚴对肝脏侵犯严重。但是,低剂量(50psc,250psc)以及中等剂量(500psc)的泡球蚴感染小鼠后,随着感染时间延长,病灶可以被宿主清除,病灶所引起的局部肝损伤也可以恢复;(2)高剂量组α-SMA以及RS染色的阳性率显著高于低剂量组(P<0.05);2000psc剂量感染后,分别在2周、24周COL1A1和CO L3A1的表达显著高于正常对照组(P<0.05);(3)250psc在不同感染时间点Th1/Th2并无明显变化,而500psc剂量Th1/Th2在感染24周时显著升高(P<0.05)。2000p sc在24周时Th1/Th2有显著下降(P<0.05);(4).高剂量组和低剂量组在感染晚期(24周)都表现为Treg/Th17平衡向Th17偏移。结论:(1)低剂量泡球蚴感染小鼠,其病灶可以被宿主清除;但是,高剂量泡球蚴感染小鼠,其病灶不能被清除;(2)高剂量泡球蚴感染小鼠可造成更严重的肝纤维化;(3)宿主免疫类型偏向Th1与Th17可能有利于病灶清除。
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