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背景脑缺血引发的血管性痴呆与海马神经元的学习、记忆功能密切相关。脑缺血及缺血再灌注后能量代谢紊乱,乳酸(LD)升高,乳酸脱氢酶(LDH)活力降低。自由基生成增多,超氧化物歧化酶(SOD)等耗竭,丙二醛(MDA)生成增加,造成脑神经元损伤和(或)细胞死亡,对学习记忆造成影响。银耳多糖作为银耳的主要活性成分,研究表明,其具有抗衰老、增强免疫、抗肿瘤、降血脂、降血糖等作用,然而,银耳多糖抗脑缺血作用报道较少。我们前期研究发现,银耳多糖具有抗脑缺血作用。基于此,本研究以脑缺血小鼠为模型,探讨银耳多糖对反复脑缺血再灌注小鼠学习记忆的影响,以期为临床应用提供实验数据。目的探讨银耳多糖对反复脑缺血再灌注小鼠学习记忆的影响,分析银耳多糖对脑缺血可能的作用机制。方法将小鼠随机分成对照组和实验组,对照组包括空白组和模型组;实验组包括尼莫地平组及银耳多糖大、中、小剂量组。除空白组和模型组外,给尼莫地平组小鼠灌服尼莫地平混悬液(0.02g·kg-1、0.2ml·10g-1),给银耳多糖各组分别灌服银耳多糖大、中、小剂量(0.4g·kg-1、0.2g·kg-1、0.1g·kg-1、0.2ml·10g-1)。空白组和模型组给予同体积生理盐水,每日1次,连续给药10天。除空白组外,其余各组动物,用10%的水合氯醛进行麻醉处理,并将上述各组小鼠仰卧位固定在鼠板上,在颈部正中进行切口,将双侧颈总动脉分离暴露,穿手术线备用。然后用针灸针阻断双侧颈总动脉,10min之后,松开针灸针,使血液再灌注10min,反复进行2次,手术之后的创口应以碘伏消毒,最后缝合伤口。术后24h,上述各组小鼠均进行行为学测定(跳台法和避暗法),24h后,重复一次,记录并比较各组间差异。将完成行为学测定的小鼠断头取脑,取一半脑组织,HE染色观察脑组织病理学变化。取另一半脑组织,量取0.9%生理盐水与组织混合制备成10%的组织匀浆液。按照试剂盒规定的检测方法分别测定LD、LDH、SOD活性及MDA含量。结果1银耳多糖对小鼠行为学的影响1.1跳台法实验与空白组对比,模型组小鼠在测试期内触电潜伏期缩短显著(P<0.01)、其训练期和测试期错误次数均增加显著(P<0.01),表明模型制作成功。尼莫地平组与模型组比,尼莫地平组可显著延长小鼠触电潜伏期并降低小鼠错误次数(P<0.01);银耳多糖大、中剂量组可显著延长小鼠触电潜伏期(P<0.01),并降低小鼠训练期及测试期跳台错误次数(P<0.01),小剂量银耳多糖能够明显降低训练期小鼠跳台错误反应次数(P<0.05),但小剂量银耳多糖对缩短潜伏期和测试期小鼠跳台错误反应次数不明显。1.2避暗法实验与空白组相比,模型组能够显著降低潜伏期(P<0.01)、增加错误反应次数(P<0.01),说明造模成功。与模型组相比,尼莫地平能够显著延长小鼠潜伏期(P<0.01)、减少小鼠错误反应次数(P<0.01),大、中剂量银耳多糖能够明显增加小鼠潜伏期(P<0.01,P<0.05),大、中剂量银耳多糖能显著降低小鼠错误反应次数(P<0.01),但小剂量银耳多糖对缩短潜伏期和错误反应次数不明显,与跳台法结果一致。2银耳多糖对脑组织病理学影响模型组:脑组织海马区有典型梗死病理变化。可梗死灶内见神经元变性明显、坏死细胞核固缩,胞体缩小,胞浆嗜酸变;组织水肿伴炎性细胞浸润。空白组:脑组织形态结构基本正常。银耳多糖大剂量组:与模型组相比缺血范围小,病理变化轻。梗死区有少量的神经元细胞变性、坏死,组织水肿轻,有少量炎性细胞浸润。银耳多糖中剂量组:与大剂量组对比缺血范围较大,病理改变加重。神经元变性坏死数量增多,组织水肿明显。银耳多糖小剂量组与大中剂量组相比,病理改变明显。梗死灶内大量的神经元变性坏死,组织水肿更明显,有大量炎性细胞。尼莫地平组:形态学变化与中剂量组基本一致。3银耳多糖对小鼠脑组织中LD、LDH含量的影响与空白组相比,模型组能够显著提高小鼠LD的含量(P<0.01)、显著减少小鼠LDH的活力(P<0.01),说明本实验造模成功。与模型组相比,尼莫地平组、银耳多糖中、小剂量组均可显著减少小鼠LD的含量(P<0.01),银耳多糖大剂量组明显地减少小鼠LD的含量(P<0.05)。尼莫地平组、银耳多糖大、中剂量组均可以显著升高小鼠LDH的活力(P<0.01),银耳多糖小剂量组升高小鼠LDH的活力不明显。4银耳多糖对小鼠脑组织中SOD活性及MDA含量影响与空白组相比,模型组小鼠脑组织中的SOD活性显著降低(P<0.01),MDA含量明显升高(P<0.05),说明造模成功。与模型组相比,银耳多糖各剂量组均能明显升高脑缺血小鼠脑组织的SOD活性(P<0.05,P<0.01),银耳多糖大、中剂量组明显降低MDA含量(P<0.05),且与剂量呈现正相关性,银耳多糖小剂量组降低MDA含量不明显。结论在一定浓度范围内,银耳多糖通过减轻缺血脑组织病理改变,减少有害代谢产物形成,提高缺血缺氧耐受力,减轻脑神经元的损害等多途径改善小鼠学习记忆能力。