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目的:蒽醌类成分是中药巴戟天的主要有效成分之一。本课题在传统提取工艺的基础上,为寻求高效、快速、节能的新方法。探讨用微波萃取法提取巴戟天中总蒽醌的最佳工艺条件;分离纯化得到有效单体,光谱鉴定其结构类型;并研究其体外抗氧化活性。
方法:1.以巴戟天中总蒽醌的含量为检测提取率的标准,研究了回流、索氏和微波提取法对巴戟天总蒽醌的提取,分别考察了各因素的影响,运用正交试验确定其最佳提取条件。2.巴戟天中蒽醌化合物的分离和纯化:以乙醇为溶剂,先运用渗漉法提取出巴戟天中的总蒽醌,然后用石油醚以一定比例萃取、浓缩后得浸膏。再用硅胶柱色谱分成不同部分,然后用硅胶柱色谱和制备薄层色谱分别处理各部分,得到未知结构化合物Ⅰ和Ⅱ。3.通过1HNMR、13CNMR和MS对所得单体化合物进行结构鉴定。4.体外抗氧化试验:采用DPPH自由基清除抗氧化模型,评价所提取的蒽醌类化合物的抗氧化活性。
结果:1.回流、索氏和微波萃取三种提取方法中,微波提取法的提取率最高,提取速度最快,时间仅是回流提取的1/9,索氏提取的1/30。2.2种单体化合物经定性分析和波谱解析确定为大黄素甲醚和甲基异茜草素。3.体外抗氧化实验表明,在试验范围内巴戟天中蒽醌类化合物对DPPH自由基有良好的清除效果,且随浓度的增大而增大。
结论:本试验对比了回流、索氏和微波提取法应用于总蒽醌成分的提取,结果表明微波萃取法具有绝对优势,不仅提取效率高,节能省时,并具有安全、节能、设备简单和适合大规模工业化生产的优点。本课题对巴戟天中蒽醌类成分进行了研究,分离得到二个蒽醌类单体成分,为进一步开发利用巴戟天药材提供了一定的依据。DPPH试验结果表明:巴戟天中蒽醌类化合物具有较强的抗氧化活性,可作为潜在的具有抗自由基活性的药物,为巴戟天的开发和应用提供了理论基础。