二烯丙基化三硫对粪肠球菌毒力因子esp、gelE基因表达的影响

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目的:研究大蒜素对照品二烯丙基化三硫(dially trisulfide,DATS)和多西环素对粪肠球菌生物膜形成相关毒力因子esp、gelE基因表达的影响,分析DATS对粪肠球菌的抑菌或杀菌作用,为临床推广使用大蒜素为根管内封药物提供实验依据。方法:采用MTT法测定粪肠球菌生长曲线,建立对数期、稳定期、饥饿期粪肠球菌生物膜模型,分别用1280μg/ml、2560μg/ml、5120μg/ml DATS和80μg/ml、160μ/ml、320μg/ml多西环素作用于各时期粪肠球菌生物膜,提取细菌生物膜样本。采用Real-time PCR技术,对不同时期的粪肠球菌生物膜毒力因子esp、gelE的基因表达相对量进行检测。结果:1.DATS和多西环素作用后,粪肠球菌生物膜esp、gelE基因表达相对量均低于用药前,差异有统计学意义(p<0.05)。2.药物作用后esp基因表达相对量情况DATS组随药物浓度增高,粪肠球菌生物膜esp基因表达相对量降低,5120μg/ml DATS(?)2560μg/ml DATS组的基因表达相对量低于1280μg/ml DATS组,差异有统计学意义(p<0.05);多西环素组随药物浓度增高,粪肠球菌生物膜esp基因表达相对量降低,差异有统计学意义(p<0.05);在对数期,2560μg/ml、5120μg/ml DATS组与160μg/m1多西环素组的esp基因表达相对量差异无统计学意义(p>0.05);在稳定期和饥饿期,2560μg/ml、5120μg/ml DATS组与80μg/ml多西环素组的esp基因表达相对量差异无统计学意义(p>0.05)。3.药物作用后gelE基因表达相对量情况DATS组随药物浓度增高,粪肠球菌生物膜gelE基因表达相对量降低,差异有统计学意义(p<0.05);多西环素组随药物浓度增高,粪肠球菌生物膜gelE基因表达相对量降低,差异有统计学意义(p<0.05);在对数期和稳定期,5120μg/ml DATS组与160μg/ml多西环素组的gelE基因表达相对量差异无统计学意义(p>0.05);在饥饿期,5120μg/ml DATS组与80μg/m1多西环素组的gelE基因表达相对量差异无统计学意义(p>0.05)。4.饥饿期粪肠球菌生物膜esp、gelE基因表达相对量,高于稳定期和对数期,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:1.DATS、多西环素能抑制粪肠球菌毒力因子esp、grlE的表达。2.2560μg/ml或5120μg/ml DATS抑制粪肠球菌毒力因子esp、gelE表达作用,与80μg/ml或160μg/ml多西环素作用相当。3.饥饿期粪肠球菌毒力因子esp、gelE的相对表达量高于对数期和稳定期。图12幅,表5个,参考文献47篇。
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