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[目的]
观察小鼠肾上腺皮质细胞系Y1细胞的TNF受体的分布；检测TNF-α对Y1细胞增殖、凋亡以及皮质醇合成的影响。探讨TNF-α对Y1细胞的增殖、凋亡以及皮质醇合成的影响及其机理。
[材料和方法]
1.应用RT-PCR和免疫细胞化学技术在mRNA和蛋白水平检测Y1细胞表面TNF受体类型.
2.应用MTT和台盼蓝据染法检测TNF-α在不同剂量、不同作用时间对Y1细胞增殖的影响.
3.应用流式细胞仪检测TNF-α在不同剂量、不同作用时间对Y1细胞凋亡的影响，同时应用酶标法检测caspase8和caspase3的变化，观察其在剂量、时间上对凋亡通路的影响.
4.应用放免法检测一定浓度的TNF-α或/和ACTH作用Y1细胞不同时间后对皮质醇合成的影响.
5.应用RT-PCR和Western-blot法检测一定浓度的TNF-α或/和ACTH作用Y1细胞不同时间后对皮质醇合成的关键基因StAR表达的影响.
[结果]
1.RT-PCR和免疫细胞化学结果显示：Y1细胞 TNF-R1 mRNA和蛋白表达阳性，TNF-R2mRNA和蛋白表达阴性.
2.Y1细胞在100～250U/ml的TNF-α作用不同时间后，细胞增殖抑制率明显升高（P<0.05），呈现剂量、时间依赖性.
3.Y1细胞在100～250 U/ml的TNF-α作用不同时间后，细胞凋亡率有所增加（P<0.05），同时caspase8和caspase3的表达增强，呈剂量、时间依赖性（P<0.05）.
4.放免结果显示：TNF-α单独作用对Y1细胞的皮质醇合成抑制作用不显著（P>0.05），ACTH单独作用后皮质醇合成显著增加（P<0.05），而50 U/ml TNF-α和10-9 mol/LACTH共同作用Y1细胞6、12、24、48h后皮质醇的合成明显受抑（P<0.05）.
5.RT-PCR和Western-blot结果显示：TNF-α单独作用对Y1细胞的皮质醇合成的关键基因StAR抑制作用不显著（P>0.05），ACTH单独作用后皮质醇合成的关键基因StAR表达显著上升（P<0.05）.而50 U/ml TNF-α和10-9mol/L ACTH共同作用Y1细胞6、12、24、48h后皮质醇合成的关键基因StAR的表达受到抑制（p<0.05）.
[结论]
1.从蛋白、mRNA水平证实，Y1细胞以表达TNF-R1为主.
2.100～250 U/ml的TNF-α能够抑制Y1细胞的增殖和诱导细胞凋亡，并呈剂量时间依赖关系.TNF-α可通过激活caspase8和caspase3通路诱导Y1细胞凋亡.
3.TNF-α单独作用对Y1细胞的皮质醇合成和StAR的影响不显著；ACTH单独作用能够促进Y1细胞皮质醇的合成和StAR的表达；50 U/ml TNF-α与10-9mol/LACTH共同作用可能通过下调皮质醇合成的关键基因StAR表达而抑制Y1细胞皮质醇的合成.