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黄芪多糖是中草药黄芪中的主要药理成分之一,既往研究发现其对机体多种免疫细胞具有重要的调节作用。然而,黄芪多糖口服后究竟是通过何种途径来作用于机体免疫细胞,目前还不十分明了。研究发现,与抗原接触以后,肠道黏膜淋巴细胞能够分泌多种与免疫相关的因子,它们不仅可以将抗原直接吞噬,还可以促进别的淋巴细胞的生成、增殖,在机体免疫调节中有着举足轻重的地位。而γδT细胞在肠道黏膜免疫中起着非常重要的作用,含量高达20-50%。故我们推测黄芪多糖口服后,可能通过调节γδT细胞来调节肠道黏膜的免疫功能继而激发机体免疫系统功能。目前,关于黄芪多糖对荷瘤机体肠道黏膜γδT细胞免疫调节作用的相关研究还未见报道。因此,本课题进行了黄芪多糖对S180荷瘤小鼠肠道黏膜γδT细胞免疫功能影响的初步研究,具体内容如下:1.采用体外实验观察黄芪多糖对S180肿瘤细胞增殖及小鼠肠道黏膜γδT细胞功能的影响,结果发现:黄芪多糖对S180细胞的增殖具有抑制作用,且能够通过促进肠道黏膜γδT细胞增殖,促进肠道黏膜γδT细胞分泌IL-2和IFN-γ,表达TNF-α mRNA、IFN-γ mRNA和FasL mRNA、GramB mRNA来达到调节γδT细胞免疫功能的作用。2.建立S180荷瘤小鼠模型,通过测量不同时间点S180荷瘤小鼠的肿瘤体积、重量来探讨黄芪多糖抗肿瘤的作用,采用荧光定量PCR法检测荷瘤小鼠肠道黏膜γδT细胞中TNF-α mRNA、IFN-γ mRNA、FasLmRNA、Gram B mRNA的表达,免疫组化法检测肠道中IgA含量,ELISA法检测荷瘤小鼠外周血中TNF-α、IFN-γ、IL-10、TGF-β含量。结果表明:给药14天后,顺铂(DDP)组、黄芪多糖低剂量(黄低)组、黄低+DDP组、黄芪多糖高剂量(黄高)组、黄高+DDP组抑瘤率分别为47.12%、7.44%、58.51%、16.76%、65.23%。与模型组相比,黄高组肠道黏膜γδT细胞中TNF-α mRNA、IFN-γ mRNA及FasL mRNA、Gram B mRNA相对含量明显增高。与模型组相比,黄芪多糖作用后荷瘤鼠肠道IgA明显升高。与模型组相比,用药组荷瘤鼠外周血中TNF-α、IFN-γ含量升高,IL-10、TGF-β含量降低。提示黄芪多糖口服后可能通过促进肠道黏膜γδT细胞免疫功能继而激发机体免疫系统来发挥抗肿瘤作用。3.建立S180荷瘤小鼠模型,采用血生化检测、脏器指数、病理切片、抑瘤率来探讨黄芪多糖对顺铂治疗S180荷瘤鼠增效减毒的影响。结果显示:黄芪多糖能够抑制荷瘤鼠肿瘤的生长,与顺铂联合运用能够达到协同的效果。与DDP组相比,给药第14天时联合用药组荷瘤鼠的体重明显增加,且联合用药后黄芪多糖可使荷瘤鼠脾脏指数和肝脏指数升高,谷丙转氨酶和谷草转氨酶含量降低,提示黄芪多糖对顺铂治疗S180荷瘤鼠能够达到增效减毒的效果。综上,黄芪多糖能够抑制S180荷瘤鼠肿瘤的生长,并对顺铂治疗S180荷瘤鼠具有增效减毒的作用。其作用机制之一可能为黄芪多糖通过某种方式刺激肠道黏膜γδT细胞,继而激发了机体免疫系统的抗肿瘤功能。