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蛋白激酶CK2（CaseinKinase2）是一种真核细胞中普遍存在且高度保守的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶，在细胞生存、生长、增殖及凋亡过程中具有重要的功能，同时它与肿瘤的发生有一定相关性。mp24是一个鼠源的新基因，功能未知。它与本课题组前期研究中的具有CK2激酶活性的人源新基因hp23氨基酸序列具有78％的同源性。为了检测mP24假定蛋白是否也具有CK2激酶活性，本实验通过检测表达外源mP24蛋白的转基因小鼠NIH3T3细胞的mP24免疫沉淀产物的磷酸化活性，来探讨mP24可能的生物学功能。 本实验对网上mp24序列进行了确认，结果发现由小鼠NIH3T3细胞获得的mp24基因序列与NCBI序列相差2个碱基，经分析证实其中一个为鼠源的单核苷酸多态（SNP）。生物信息学分析显示：mP24具有4个CK2的磷酸化作用位点，1个PKC的磷酸化作用位点以及2个N-肉豆蔻基化作用位点。 构建了能够表达mP24-V5融合蛋白的真核表达载体pcDNA3.1/mp24，利用瞬时转染获得表达mP24-V5融合蛋白的小鼠NIH3T3细胞。利用V5抗体的细胞免疫荧光方法将mP24-V5融合蛋白定位于细胞质基质，线粒体以及细胞核。 利用UpState公司的CK2激酶活性检测试剂盒，以转染pcDNA3.1/mp24的小鼠NIH3T3细胞的V5免疫沉淀产物为实验材料，分别从mP24作为CK2激酶本身以及CK2激酶磷酸化底物两个方面对mP24的磷酸化活性进行了检测。检测结果证实：mP24极有可能作为CK2激酶的底物被磷酸化。同时，利用定点突变技术将mP24假定蛋白结构域中预测的第二个CK2磷酸化位点中的丝氨酸进行了突变，突变体磷酸化活性的检测结果显示，此磷酸化位点可能影响到mP24的磷酸化活性。 根据以上结论，可以推断mP24假定蛋白作为一个新的CK2激酶磷酸化的作用底物，可能影响到小鼠细胞的生物学功能。