【摘 要】
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目的:以赪桐的根为研究对象,对其进行以下研究:1.研究赪桐根石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、95%乙醇部位提取液的抗炎作用,并确定抗炎作用有效部位及其作用机制;2.建
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目的:以赪桐的根为研究对象,对其进行以下研究:1.研究赪桐根石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、95%乙醇部位提取液的抗炎作用,并确定抗炎作用有效部位及其作用机制;2.建立赪桐根抗炎有效部位高效液相指纹图谱;3.建立赪桐根中3种不同极性部位中咖啡酸、毛蕊花糖苷和山柰酚成分含量测定的方法。方法:1.使用二甲苯所致小鼠耳肿胀法、角叉菜胶所致小鼠足趾肿胀法、小鼠棉球肉芽肿、醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的变化的方法,观察赪桐根石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、95%乙醇部位提取物的抗炎作用,并确定抗炎作用有效部位;并采用二甲苯致摘除小鼠双侧肾上腺小鼠耳肿胀、角叉菜胶致摘除小鼠双侧肾上腺小鼠足趾肿胀法等,判断其抗炎作用是否依赖下丘脑垂体肾上腺轴(HPAA)系统,测定足趾炎性组织MDA、NO含量和SOD活性,并对大鼠血清中TNF-α、PGE2、IL-1β、IL-6、LTB4进行含量测定,进一步探索其抗炎机制;2.使用高效液相色谱法建立赪桐根抗炎有效部位高效液相指纹图谱;3.采用高效液相法同时测定赪桐根3种不同极性部位中咖啡酸、毛蕊花糖苷和山柰酚成分的含量;采用Thermo ODS-2 HYPERSIL色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),甲醇-0.05%冰醋酸为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0m L/min;柱温为30℃,检测波长为320nm,进样量为15μL。结果:1.赪桐根石油醚部位提取液、乙酸乙酯部位提取液、正丁醇部位提取液、95%乙醇部位提取物对二甲苯所致小鼠耳肿胀、角叉菜胶所致小鼠足趾肿胀、对醋酸所致小鼠毛细管通透性、小鼠棉球肉芽肿均有抑制作用。赪桐根石油醚部位提取液、正丁醇部位提取液对二甲苯所致摘除肾上腺小鼠耳肿胀及角叉菜胶致摘除小鼠双侧肾上腺小鼠足趾肿胀均有抑制作用;且赪桐根不同极性部位均能降低炎性组织中MDA、NO含量、提高SOD活性及降低AA大鼠血清中TNF-α、PGE2、IL-1β、IL-6、LTB4的含量。2.使用HPLC梯度洗脱程序,并通过指纹图谱相似度软件计算10批样品与标准图谱的相似度均在0.89以上,建立了赪桐根抗炎有效部位指纹图谱,赪桐根不同极性部位指纹图谱的共有峰及峰数均有一定的差异。3.采用高效液相色谱法同时测定赪桐根3种不同极性部位中咖啡酸、毛蕊花糖苷和山柰酚成分含量的方法可靠,其成分的线性关系均良好(r>0.9996),平均加样回收率均大于95%,RSD值均小于3%。结论:赪桐根抗炎有效部位为石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、95%乙醇部位,除赪桐根乙酸乙酯部位提取物外,其他极性部位抗炎作用的发挥不依赖下丘脑垂体肾上腺轴(HPAA)系统。赪桐根不同极性部位均能减少MDA、NO、TNF-α、PGE2、IL-1β、IL-6、LTB4等炎性因子、提高SOD活性。建立壮药赪桐根抗炎有效部位的指纹图谱方法可以对赪桐根不同极性部位提取物中的特征成分进行定性与定量测定,并对赪桐的质量评价方法和充分、合理利用赪桐资源有重要的科学意义,为指导临床用药及开发抗炎新药提供基础研究。
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