石柱参咀嚼片制备工艺及质量控制方法研究

来源 :沈阳药科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:WPF0731
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分别以总皂苷和总糖的含量为指标,采用正交试验设计与单因素考察相结合的方法对石柱参的提取、纯化工艺进行考察和优化,得到石柱参总皂苷和多糖两种提取物。确定石柱参总皂苷提取物的制备工艺为:石柱参粉碎后,以12倍量的70%乙醇为提取溶剂,回流提取3次,每次2 h,所得总固体物中总皂苷的含量为13.3%。石柱参多糖提取物的制备工艺为:经提取总皂苷后的石柱参药渣以20倍量的水为溶剂,回流提取4次,每次2 h,所得提取液滤过,滤液浓缩至药液比为1:8后,调节乙醇浓度为85%,4℃下放置24 h,所得沉淀物经洗涤和干燥,得多糖固体物,固体物中总糖的含量为3.0%。以石柱参咀嚼片的硬度和口感两个因素为指标优化处方和工艺,对辅料中的赋形剂、矫味剂及润滑剂的配比和用量进行考察,并参考已上市的西洋参含片等产品确定剂量。确定最终的处方工艺为石柱参总皂苷提取物163 g、石柱参多糖提取物67g、微晶纤维素50 g、甘露醇320 g、糖精钠1.2 g、硬脂酸镁3.0 g,加适量75%乙醇为粘合剂,经湿法制粒后压制成石柱参咀嚼片。建立了TLC法对石柱参、总皂苷提取物及其咀嚼片中人参皂苷Rg1、Re、Rb1进行鉴别。建立了HPLC法测定石柱参、总皂苷提取物及其咀嚼片中的人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2含量的方法,其色谱条件为:KromasilC18柱(4.6 mm×250 mm,5 gm),检测波长203 nm,流速1mL/min,柱温25℃,流动相为乙腈-水,梯度洗脱。人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc和Rb2分别在19.8-198μg/mL、20.6~2061μg/mL、33.0-330μg/mL、18.0-180μg/mL和13.0-130μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系。该方法可用于石柱参、总皂苷提取物及其咀嚼片的质量控制。采用超高效液相色谱-电喷雾离子化-串联质谱(UPLC-ESI-MS/MS)技术,对石柱参中的皂苷类成分进行定性分析。色谱柱为AcQuity UPLCTM BEH C18柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱。在全扫描模式下,获得总离子流色谱图,通过对正负离子模式下的准分子离子峰([M+Na]+和[M-H]-)的质荷比(m/z)进行分析,确定了31个皂苷类成分的相对分子质量,并通过与对照品对照、分析各成分的MS和MS/MS光谱图及与文献比较的方法,推测了其中29个皂苷类成分的化学结构,分析时间为30 min。采用UPLC-ESI-MS/MS技术,对石柱参中不同部位(芦头、须根、主根、全须参、茎和叶)的三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rf,Rg2、Rb1、Rb2、Rb3、Rc和Rd的含量进行定量分析,并间接定量分析了丙二酰基人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rb2、Rb3、Rc和Rd的含量。色谱柱为AcQuity UPLCTM BEH C18柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,分析时间为10 min;质谱条件为ESI源,负离子扫描,选择离子监测(SIR)模式。结果表明石柱参各部位中皂苷类成分含量差异较大,丙二酰基人参皂苷在石柱参各部位都存在,且丙二酰基人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc和Rd含量较高。该研究为石柱参的合理开发利用提供参考。
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