胰腺癌免疫浸润特征与临床特征及预后的相关性

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目的:肿瘤中浸润的免疫细胞与肿瘤的浸润、进展、转移等过程相关,但免疫细胞在胰腺癌中的作用尚不明确,因此我们进行胰腺癌免疫浸润特征与临床特征及预后的相关性的分析。资料与方法:从TCGA数据库中下载胰腺癌样本的基因转录谱数据及临床数据。将重复的基因表达数据取平均值后保留,并删除其余重复以及表达量为0的基因,经校正后获得182例胰腺癌样本的基因转录谱数据,其中178例为肿瘤组织,4例为癌旁组织。整理临床数据。将校正后的182例样本的基因转录谱数据代入CIBERSORT算法,使用标准化的基因表达数据来推断样本中22种浸润免疫细胞的相对比例,模拟次数为100次。由于CIBERSORT使用Monte Carlo采样,可以为每个样本的反卷积导出一个P值,从而通过P值来判断预测结果的准确性。将P>0.05的数据删除后可得到138例样本,其中134例为肿瘤组织,4例为癌旁组织。首先使用Wilcoxon秩和检验或Kruskal-Wallis秩和检验对非配对样本进行比较,分析22种免疫细胞在134例肿瘤组织与4例癌旁组织中表达的差异性,以及肿瘤浸润免疫细胞之间表达的相关性。再将134例肿瘤组织的肿瘤浸润免疫细胞数据与胰腺癌临床性状数据合并,删除临床数据不完整的样本,分析剩余样本中肿瘤浸润免疫细胞与年龄、性别、肿瘤分级、临床分期这些临床性状的相关性。最后将134例样本基因转录谱数据与临床性状中的生存时间、结局进行合并,根据免疫细胞表达量的中位数将样本分为高表达组与低表达组,采用kaplan-Meier方法分析每种免疫细胞表达与生存的关系,并采用long-rank进行检验。结果:22种免疫细胞中单核细胞(P=0.025)和未活化的CD4~+记忆T细胞(P=0.040)在肿瘤组织和癌旁组织的表达具有差异性,其中单核细胞在癌旁组织中表达较高,未活化的CD4~+记忆T细胞在肿瘤组织中表达较高。胰腺癌中浸润的22种免疫细胞之间存在不同程度的相关性,CD8~+T细胞与M0巨噬细胞呈现中等强度的负相关(Pearson相关系数为-0.55)。胰腺癌中免疫细胞的表达与临床特征的相关性分析显示,在年龄、性别方面免疫细胞表达与胰腺癌临床特征无相关性(P>0.05)。滤泡辅助性T细胞的表达与肿瘤级别具有相关性(P=0.010),而且在G3期的表达高于G2期。关于TNM临床分期中,原始B细胞的表达与T分期具有相关性(P=0.044),在T1+T2期的表达高于T3+T4期。N分期与22种免疫细胞的表达未发现有相关性。而活化的肥大细胞、活化的树突状细胞、活化的CD4~+记忆T细胞的表达与M分期具有相关性,其中活化的肥大细胞(P=0.003)与活化的树突状细胞(P=0.046)在M1期比M0期具有较高的表达,而活化的CD4~+记忆T细胞(P=0.023)在M0期比M1期具有更高的表达。22种免疫细胞中原始B细胞的表达与临床分期有关(P=0.045),kaplan-Meier生存曲线显示CD8~+T细胞(long-rank P=0.034)的高表达与较长的生存期相关。结论:单核细胞和未活化的CD4~+记忆T细胞在胰腺癌组织及癌旁组织中的表达具有差异性。在胰腺癌的22种免疫细胞之间存在不同程度的相关性。免疫细胞表达在年龄、性别方面无相关性,而在肿瘤级别、TNM临床分期有相关。与胰腺癌临床性状相关免疫细胞可能对胰腺癌患者早期诊断具有指导意义。CD8~+T细胞的表达与胰腺癌的生存期具有相关性。检测患者CD8~+T细胞的表达情况,可能对判断胰腺癌患者的预后有指导意义,而且通过增加CD8~+T细胞在胰腺癌组织中的浸润可能有助于增加胰腺癌患者的生存期。
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