共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscopy,CLSM)是近年来新兴的具有高分辨率的光学显微镜,其具有原位、实时、动态三维等特点,从而保证可以在细胞生理状态下进行诊断,还可实时动态地对同一组织多次成像,减少了传统切片制作过程中人为因素的影响。由于CLSM具有较好的敏感性和特异性,常被用于皮肤疾病特别是皮肤肿瘤的诊断和鉴别诊断。同时还可以帮助术者快速确定需要切除的皮损边界,方便手术范围的评估。皮肤肿瘤大多见于老年人,以日光性角化病、基底细胞癌、鳞状细胞癌为多见,肿瘤首先是在细胞水平发生变化,肉眼无法准确地判定恶性病变的切除范围,Mohs显微外科手术是皮肤外科技术与特殊冰冻组织切片相结合的一种手术方法,具有可实时观察手术标本的特点,不仅能保证一次手术完整彻底切净肿瘤组织,使肿瘤复发率相当低和伤口易于愈合,而且能最大限度地减少皮肤缺损面积,为进一步整形修复打下良好的基础。但其手术费用高、手术时间长,限制了在国内的的进一步开展,这就需要我们进一步探索测定皮肤肿瘤边界的新技术。本研究通过应用CLSM观察日光性角化病、基底细胞上皮瘤患者皮损周边情况,确定肿瘤边界,与组织病理学结果相比较,从而为CLSM测定肿瘤边界提供理论依据。实验共分三个部分：第一部分应用CLSM观察健康人的皮肤结构,健康志愿者12人,年龄41岁-73岁,平均年龄57岁。检测前臂皮肤,得到正常皮肤CLSM图像,与传统组织病理作对比；第二部分应用CLSM观察日光性角化病患者皮损周边图像,确定肿瘤边界,与组织病理确定的边界进行分析对比,统计学分析应用t检验；第三部分应用CLSM观察基底细胞上皮瘤患者皮损周边图像,确定肿瘤边界,与组织病理确定的边界进行分析对比,统计学分析应用t检验。第一部分研究获得与病理切片相对应的正常皮肤的CLSM图像特征；第二部分应用CLSM对10例病理已确诊为日光性角化病患者皮损边缘处进行观测、记录,与病理检测边界进行对比,在统计学上无明显差异,将CLSM观测结果与常规手术切除边界进行对比,发现CLSM组明显低于常规值,具有统计学意义；第三部分应用CLSM对11例病理已确诊为基底细胞上皮瘤患者皮损边缘处进行观测、记录,与病理检测边界进行对比,在统计学上无明显差异,将CLSM观测结果与常规手术切除边界进行对比,发现CLSM组明显低于常规值,具有统计学意义。实验结论：CLSM可有效确定日光性角化病、基底细胞上皮瘤患者皮损边界,指导临床手术切除病灶。CLSM具有实时、无创的特点,在指导皮肤肿瘤切除方面具有广泛的应用前景,值得进一步推广。