【摘 要】
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在细胞内ATP依赖型的蛋白质选择性降解途径——泛素-蛋白酶体途径中,热休克蛋白70的C末端相互作用蛋白(CHIP)可以与热休克蛋白相互协同来降解细胞内错误折叠的蛋白质,CHIP被
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在细胞内ATP依赖型的蛋白质选择性降解途径——泛素-蛋白酶体途径中,热休克蛋白70的C末端相互作用蛋白(CHIP)可以与热休克蛋白相互协同来降解细胞内错误折叠的蛋白质,CHIP被认为是一种E3泛素连接酶,负责细胞的质量控制。在癌细胞中,由于癌基因与抑癌基因的表达产物异常,必然导致细胞内ATP依赖型的蛋白质选择性降解途径——泛素-蛋白酶体途径的异常,CHIP的表达量也可能随之异常。对正常组织和癌组织中CHIP蛋白表达量的比较研究,有助于阐明泛素-蛋白酶体途径异常与肿瘤发生之间的关系,并且有助于肿瘤的早期诊断。我们从转录水平和翻译水平两个层次来研究CHIP在食管的正常组织及癌组织的表达量。在转录水平研究上,利用琼脂糖凝胶电泳及实时荧光定量PCR技术,对不同组织中的CHIP的mRNA转录量进行定性及定量比较研究;在翻译水平研究上,利用免疫组化技术,对不同组织中的CHIP蛋白量进行比较研究,从而对其在正常组织与癌组织的表达差异进行研究。通过以上三种技术的检测、比较,结果显示,CHIP蛋白在正常组织与癌组织中的表达,不管是在转录水平上,还是在翻译水平上均存在着巨大的差异性,这将有助于阐明细胞癌变过程中,泛素-蛋白酶体所起的作用,为药物化学中抗癌药物的合成寻找新的靶点提供理论和实验依据,也为将来药物合成新的小分子抗癌活性物质或开发新型癌症诊断、分型、治疗试剂提供新思路和指导。
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