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目的:
沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,C.trachomatis)感染是目前全球严重公共卫生问题之一,然而其相关的感染免疫机制尚未阐明。Treg与Th17是近年来颇受关注的密切相关的两群重要免疫细胞,参与多种感染性疾病进程,但在衣原体感染中二者关系尚不清楚。本研究拟在建立沙眼衣原体小鼠肺感染模型的基础上,对沙眼衣原体在BALB/c小鼠肺部感染过程中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)与IL-17/Th17反应关系进行初步研究。
方法:
取6-8周龄的BALB/c小鼠,鼻腔吸入25μl含5×103 IFU的沙眼衣原体鼠肺炎菌株(Chlamydia muridarum,Cm),建立沙眼衣原体小鼠肺感染模型。监测感染后不同时期小鼠体重变化;检测肺组织衣原体包涵体形成单位(IFU)及肺组织病理改变;利用化学发光免疫分析法检测肺组织中髓过氧化物酶(MPO)的水平;利用流式细胞术检测Cm感染后小鼠脾脏和纵隔淋巴结(MLN)中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞百分率及脾脏中CD4+CD44+IL-17+T细胞的百分率;RT-PCR检测肺组织中IL-6、TGF-β、IL-17、IL-2、IFN-γ细胞因子和趋化因子KC(keratinocyte derived chemokine)和MIP-2(macrophage inflammatoryprotein-2)mRNA的表达差异;进一步通过ELISA检测肺组织上清液IL-6、TGF-β、IL-17、IL-2细胞因子的的表达水平。
结果:
用5(×)103IFU Cm经鼻腔吸入感染后小鼠发生沙眼衣原体肺炎,表现为体重下降、肺组织大量炎症细胞浸润并可检测到衣原体的繁殖。肺组织中MPO从第3天开始增高,第7天达到峰值,随后随着炎症的清除逐渐减少。Cm感染后第3天,小鼠体内Treg细胞占CD4+T细胞的百分比明显降,随后开始恢复,第7天恢复原来水平,一直持续到衣原体清除。IFN-γ在感染后的第3天显著升高,与Treg细胞呈负相关。TGF-β、IL-2的表达与Treg细胞动态变化一致。与Th17相关细胞因子IL-6、IL-17和Th17相关趋化因子KC、MIP-2的表达于第3天开始升高,至第7天达到最高水平,随后逐渐减少。脾脏CD4+CD44+IL-17+T细胞从第3天开始增高,第7天大量扩增。
结论:
BALB/c小鼠呼吸道感染衣原体后,引起典型的鼠衣原体肺炎;沙眼衣原体呼吸道感染诱导小鼠产生高水平的IL-17/Th17应答;在衣原体感染BALB/c小鼠过程中,Treg可能通过提供TGF-β并在IL-6帮助下促进Th17应答产生。该研究初步探讨了沙眼衣原体肺部感染过程中Treg与Th17应答的可能关系,为进一步深入揭示沙眼衣原体感染免疫机制提供了重要线索。