【摘 要】
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目的:选择中脑腹侧被盖区（VTA）为目标核团,观察VTA区多巴胺转运蛋白是否参与老龄大鼠术后认知功能障碍,通过调节VTA区多巴胺转运蛋白表达的变化,观察海马区α-synuclein、β-Amyloid1-42蛋白聚集情况。探究VTA区多巴胺转运蛋白的变化与老龄大鼠术后发生认知功能障碍之间的关系,寻找减轻围术期认知功能障碍的新途径和方法。方法:选取80只雄性SD大鼠,18-20月龄,体质量300-5
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目的:选择中脑腹侧被盖区（VTA）为目标核团,观察VTA区多巴胺转运蛋白是否参与老龄大鼠术后认知功能障碍,通过调节VTA区多巴胺转运蛋白表达的变化,观察海马区α-synuclein、β-Amyloid1-42蛋白聚集情况。探究VTA区多巴胺转运蛋白的变化与老龄大鼠术后发生认知功能障碍之间的关系,寻找减轻围术期认知功能障碍的新途径和方法。方法:选取80只雄性SD大鼠,18-20月龄,体质量300-500g。随机分为8组:空白组（Normal,N）、假手术组（Sham,S）、模型3天组（PND,P3）、模型7天组（PND,P7）、病毒3天组（AAV3）、病毒7天组（AAV7）、病毒对照3天组（NC3）、病毒对照7天组（NC7）。假手术组大鼠仅开腹探查;模型组大鼠进行丙泊酚全麻下脾切除手术;病毒组大鼠在立体定位颅内注射技术下行中脑腹侧被盖区多巴胺转运蛋白敲低腺病毒脑内注射;病毒对照组在立体定位颅内注射技术下行中脑腹侧被盖区多巴胺转运蛋白敲低阴性对照病毒空壳载体脑内注射。利用Morris水迷宫及条件恐惧实验分别判断术后3天与术后7天各组大鼠认知功能损伤程度;免疫荧光染色观察VTA区DAT的表达情况,海马CA1区α-synuclein（α-syn）、β-Amyloid1-42（Aβ1-42）的蛋白定位及定量表达情况;Western blot（WB）法检测海马α-synuclein（α-syn）、β-Amyloid1-42（Aβ1-42）的蛋白含量,比较各组间蛋白含量的差异。结果:在行为学检测中发现,与N组比较,术后3天和术后7天大鼠表现出明显的认知功能减退,在Morris水迷宫实验中,老龄大鼠术后3天与术后7天在目标象限停留时间与穿越目标平台的次数较术前明显减少（P<0.05）,逃避潜伏期较术前明显延长（P<0.05）,而将VTA区多巴胺转运蛋白敲低后,老龄大鼠术后认知功能减退得到明显改善;在条件恐惧实验中发现,术后3天与术后7天老龄大鼠对于场景的恐惧记忆能力较术前明显减退（P<0.05）,术后3天对于声音恐惧记忆较术前减退（P<0.05）,于术后7天基本可恢复至术前水平（P>0.05）,将VTA区多巴胺转运蛋白敲低后可以改善大鼠这种记忆功能的损害;免疫荧光与WB结果均显示,与N组相比,老龄大鼠术后3天与术后7天海马CA1区α-synuclein、β-Amyloid1-42蛋白含量明显升高（P<0.05）;而将VTA区多巴胺转运蛋白敲低后,海马CA1区α-synuclein、β-Amyloid1-42蛋白含量较手术组明显降低（P<0.05）。结论:VTA区多巴胺转运蛋白参与了老龄大鼠由麻醉手术诱发的认知功能障碍,并且VTA区DAT变化对老龄大鼠术后认知功能的影响可能与调控海马区α-syn、Aβ1-42蛋白聚集有关。
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