溴虫腈对家蚕和甜菜夜蛾的选择毒性及选择机制研究

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本研究以家蚕和甜菜夜蛾为试虫,测定了溴虫腈对两种试虫的选择毒性差异,并提取了家蚕和甜菜夜蛾的线粒体,研究溴虫腈对两种试虫线粒体内氧化磷酸化的阻断差异;比较了家蚕和甜菜夜蛾细胞色素P450的差异;探讨了各解毒酶代谢和穿透作用对溴虫腈选择作用的协同关系。主要结果如下:1.采用食下毒叶法在室内测定了溴虫腈对各龄期家蚕的毒性,48h结果表明,溴虫腈对各龄期家蚕的LC50值分别为122.06、85.25、103.78和243.14 mg·L-1,其中3龄家蚕最为敏感。采用浸叶法在室内测定了溴虫腈对甜菜夜蛾的毒力,对2至5龄期甜菜夜蛾的LC50值分别为0.1979、0.2774、0.4307和0.9643 mg·L-1。其中2龄甜菜夜蛾幼虫最为敏感。溴虫腈对相同龄期幼虫2龄和3龄的家蚕和甜菜夜蛾幼虫的毒力分别相差616.77倍和307.32倍,毒性选择性很高。2.采用点滴法测定了PBO(增效醚)、SV1(增效磷)、DEM(顺丁烯二酸二乙酯)、TPP(磷酸三苯酯)对溴虫腈的增效作用。结果表明,点滴TPP后,溴虫腈对两种试虫均增效显著,对家蚕的增效倍数为2.83倍,对甜菜夜蛾增效2.9倍。点滴DEM后,溴虫腈对甜菜夜蛾增效最为显著,增效3.61倍;对家蚕略有增效,增效倍数仅为1.06。点滴SV1后,对家蚕略有增效,对甜菜夜蛾增效不显著。点滴PBO后,对两种试虫的毒力增效均不显著,尤其对甜菜夜蛾,出现毒力降低现象。3.氧化磷酸化解偶联试验结果表明,甜菜夜蛾处理组和对照组粒体中氧化磷酸化过程无机磷变化(ΔPi)差异显著。随着浓度的增加,ΔPi有增大趋势。而家蚕处理组和对照组线粒体中氧化磷酸化过程无机磷变化(ΔPi)差异不显著。ΔPi变化大,说明对氧化磷酸化过程的影响大。溴虫腈在对家蚕线粒体解偶联过程中ΔPi没有明显变化,表明溴虫腈对家蚕毒性低。4.呼吸代谢加快是昆虫抵御外来侵入有毒物质的一种方式。结果表明,只有以溴虫腈50μg/g处理的家蚕有呼吸峰出现,且随着测试时间延长,呼吸量变化和对照组呼吸变化趋势基本一致。甜菜夜蛾处理组呼吸变化量均有高峰出现,以25μg/g处理组大约在处理9 h后达到呼吸顶峰,此时呼吸量为对照组的1.5倍;以50μg/g处理组呼吸变化量在处理6h时达到呼吸最高峰,呼吸量为对照组的3.6倍。5.加入酶抑制剂前后对解毒酶的活性有不同的影响。抑制剂对家蚕体内羧酸酯酶、GST均有不同程度抑制作用,但对多功能氧化酶无影响。溴虫腈对家蚕和甜菜夜蛾的解毒酶均有不同程度的激活作用。加入增效剂剂量在一定范围内与酶抑制率呈正相关关系,当剂量超过一定范围时,酶抑制率保持在一定水平,不再随剂量增加而递增(如甜菜夜蛾PBO对MFO和DEM对GST的抑制作用)。家蚕体内的多功能氧化酶由于量少且活性极低,无法测出其活性及含量。6.溴虫腈对家蚕和甜菜夜蛾酚氧化酶均有激活作用。随着溴虫腈处理时间的增加,家蚕的酚氧化酶比活力和增长率与时间成正比递增;甜菜夜蛾酚氧化酶的活性在一定的浓度范围内与时间成正比增长,增长比率是先增后减。
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