【摘 要】
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目的1.检测USP9X在喉癌组织中的表达水平,并结合患者临床及病理资料综合分析在喉癌组织中USP9X的相关意义,总结出喉癌定性和疗效评估的参照标准。2.探讨USP9X的表达对喉癌细胞生物学行为的影响,与此同时深入探索喉癌形成和迅速发展的机制。方法1.喉癌石蜡组织切片共86例,来自2019年5月至2020年5月就诊于安徽医科大学第一附属医院耳鼻咽喉科行喉癌手术治疗的患者。新鲜的喉癌标本共36例,来自
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目的1.检测USP9X在喉癌组织中的表达水平,并结合患者临床及病理资料综合分析在喉癌组织中USP9X的相关意义,总结出喉癌定性和疗效评估的参照标准。2.探讨USP9X的表达对喉癌细胞生物学行为的影响,与此同时深入探索喉癌形成和迅速发展的机制。方法1.喉癌石蜡组织切片共86例,来自2019年5月至2020年5月就诊于安徽医科大学第一附属医院耳鼻咽喉科行喉癌手术治疗的患者。新鲜的喉癌标本共36例,来自2019年5月至2021年5月就诊于安徽医科大学附属巢湖医院耳鼻咽喉科行喉癌手术治疗的患者。通过免疫组化检测86例喉癌组织及切缘组织中USP9X的表达。通过RT-PCR和WB检测36例癌和癌旁组织中USP9X m RNA和蛋白表达。2.在细胞实验中,使用Si RNA抑制人咽喉癌Fadu细胞中USP9X表达,将USP9X Si RNA和Si-NC RNA转染Fadu细胞,经过相应处理后分成3组:Blank组、Si-NC组和Si-USP9X组。使用RT-PCR和WB检测不同处理组细胞中USP9X的m RNA和蛋白含量;使用平板克隆形成实验和CCK8法检测不同组细胞克隆能力;使用细胞划痕实验和Trans well迁移实验分别分析不同组迁移和侵袭能力;使用流式细胞术检测不同组细胞凋亡水平。结果1.免疫组化结果提示在86例喉癌组织中,73例（84.88%）组织的USP9X呈阳性表达,USP9X在喉癌组织的阳性表达与性别、年龄、相关临床分期和淋巴结是否转移无明显差异（P＞0.05）,与分化程度有明显差异（P＜0.05）;RTPCR结果显示在36例喉癌组织中USP9X表达升高（32/36）;WB结果显示在36例喉癌组织中USP9X蛋白含量升高（31/36）。2.构建完成Si RNA-USP9XFadu细胞,RT-PCR及WB结果显示USP9X的m RNA和蛋白含量显著下降。SiUSP9X组相较于Si-NC组和Blank组发现,USP9X低水平导致喉癌细胞克隆,迁移和侵袭水平降低,凋亡水平上升。结论1.在喉癌组织中,USP9X表达水平升高,与分化程度有相关,为喉癌的定性诊断和治疗方案以及潜在干预靶点提供了参照标准。2.USP9X可能是喉癌细胞增殖,迁移,侵袭以及凋亡和的关键调控基因,对喉癌的形成和快速发展具有促进作用。
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