有机磷农药的使用给环境带来了日益严重的污染问题，本实验室从三明农药厂分离得到了一株高效降解有机磷农药的细菌（JS018），本研究对JS018菌的降解酶进行纯化，以及对它的生物学特性进行研究，同时还初步探讨了降解酶的基因克隆： 1、细菌JS018有机磷农药降解酶的纯化及同源性分析 细菌JS018有机磷农药降解酶经硫酸铵分级沉淀，Sephadex G-100凝胶过滤，及DEAE-52柱层析，获得的酶液经SDS-PAGE电泳为一条蛋白带，测得该酶的分子量约为37Kda，同时表明纯化后的蛋白组分已达到电泳纯。对纯化后的甲基1605降解酶进行了N末端序列测定：GAPFQNDVPPACYRFR。同源性分析表明，细菌JS018的甲基1605降解酶与已报道的有机磷农药降解菌AAK44461和NP-334647的降解酶同源性仅为29％，可能为一种新的降解酶。 2、细菌JS018有机磷农药降解酶的特性研究及动力学分析 酶特性研究表明：酶作用的最适温度约为35℃，在15℃～35℃酶较稳定；最适pH约在8.5，在pH5.5～9之间较稳定；低浓度的甲醇可以提高甲基1605降解酶的活性。 EDTA浓度小于1mmol L^-1时，对酶活没有影响或影响很小，当EDTA浓度大于1mmol L^-1时，会抑制酶活性，抑制作用随着浓度的增加而加强，当EDTA浓度达到25mmol L^-1时，几乎完全抑制酶的活性。1mmol L^-1 Tween-20和Tween-80会抑制酶活性，抑制率分别为21.6％和16.1％。1mmol L^-1浓度的Fe²⁺和Ca²⁺有促进酶活作用，分别提高酶活28％和14.1％；1mmol L^-1 K⁺、Co²⁺、Li⁺、Na⁺和Mg²⁺对酶活没有什么影响；1mmol L^-1浓度的Ba²⁺、Fe³⁺、Ag⁺、Al³⁺、Cu²⁺、SDS、Hg²⁺和Cu²⁺会强烈地抑制酶活性。金属离子对酶有影响，推测该酶可能为金属酶。用甲基1605作底物，测得Km为63.559μmol．L^-1，Vmax为14.124μmol．min^-1。 通过以上实验可以看出，JS018菌OPD酶有可能是一种新的有机磷农药降解酶，丰富了有机磷农药降解酶的理论知识；同时，这种OPD酶是一种相对广谱的降解酶，具有很强的实际利用价值。