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目的研究HSPA12B在大鼠颈部异位心脏移植模型中的表达变化,探讨它在心脏移植术后急性排斥反应过程中的生物学功能。方法1、利用套管按改良的颈部异位心脏移植法制作心脏移植模型。以Wistar-Furth(WF:RT1u)大鼠心脏移植至Lewis(Lew:RT1l)大鼠作为异基因组,Lewis大鼠心脏移植至Lewis大鼠作为同基因组。2、通过HE染色来观察大鼠心脏移植术后急性排斥反应的病理变化过程。3、通过蛋白印迹分析、免疫组织化学和免疫荧光染色等方法观察active caspase-3在心脏移植术后急性排斥反应过程中的表达变化、组织分布和细胞定位。4、通过蛋白印迹分析、免疫组织化学和免疫荧光染色等方法观察HSPA12B在心脏移植术后急性免疫排斥反应过程中的表达变化、组织分布和细胞定位。并在此基础上探讨其在急性排斥过程中的潜在作用。结果1、组织病理学结果显示:异基因组大鼠心脏移植术后第3天开始,血管周开始出现淋巴细胞浸润,表现为I级急性排斥反应。第4天,浸润的淋巴细胞继续增加,同时出现心肌细胞水肿。第5天,多灶性淋巴细胞浸润,伴有严重的心肌水肿和坏死,表现为III级或IV级急性排斥反应。第6天,部分正常心肌组织被浸润的淋巴细胞和单核细胞浸润,出现严重的心肌水肿,广泛出血、血栓、心肌坏死和血管退化等,表现为IV级急性排斥反应。第7天,大部分的正常心肌组织消失,代之以大量浸润的淋巴细胞和单核细胞。2、蛋白印迹分析实验检测发现HSPA12B蛋白表达水平在大鼠正常心脏中较低。在移植后第1-2天,同基因组和异基因组的蛋白表达量都增加。随后同基因组的表达量逐渐下降并趋于正常心脏的表达量,而异基因组的表达量则逐渐增加并在第5天达到高峰。3、免疫组织化学染色分析发现在移植后1d的异基因和同基因组中HSPA12B是主要分布在内皮细胞和心肌细胞表面的(少量表达在心肌细胞),移植后5-7d,异基因组HSPA12B的表达显著增加,主要在心肌细胞(胞浆)、浸润的免疫细胞和炎症细胞。而同基因组HSPA12B的表达则逐渐减少。4、蛋白印迹分析实验检测发现active caspase-3蛋白表达水平在急性心脏移植后排斥反应过程中呈显著上调趋势。免疫组织化学染色分析发现在正常心脏和移植后5d的同基因组中active caspase-3的表达很少,而移植后5d的异基因移植物active caspase-3的表达显著增加,主要在心肌细胞(胞浆)。运用免疫荧光双标技术,结果发现在移植后5d,异基因组HSPA12B与active caspase-3共定位明显多于同基因组。结论HSPA12B在心脏移植术后急性排斥反应过程中的表达上调,可能参与了心肌细胞凋亡的病理生理过程,从而影响了心脏移植术后的急性排斥反应。