缺氧诱导因子-1对新生大鼠肺血管发育影响的研究

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[目的]  本实验以新生SD大鼠为实验对象,观察腹腔注射DMOG(脯氨酰羟化酶抑制剂:二甲基乙二酰基甘氨酸)对新生大鼠肺组织HIF-1和VEGF表达的影响,观察HIF-1对新生大鼠肺血管发育的影响,探讨HIF-1对肺发育影响的机制。  [方法]  1.将自然分娩的73只新生SD大鼠通过抽签法抽取64只,再将64只新生SD大鼠通过随机数字表法随机分为两组:实验组和正常对照组,每组各32只。实验组新生SD大鼠腹腔注射DMOG(剂量:40mg·kg-1·d-1),正常对照组新生大鼠腹腔注射等体积生理盐水。两组于实验第4天、7天、10天和14天分别随机抽取8只大鼠后处死。  2.对两组大鼠肺组织进行HE染色,光镜下观察形态学改变,并进行放射性肺泡计数(RAC)。  3.采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测两组大鼠肺组织HIF-1α和VEGFmRNA表达水平。采用蛋白质免疫印迹(Western Blotting)方法检测两组大鼠肺组织HIF-1α和VEGF蛋白表达水平。  4.所有实验数据均以均数±标准差表示,用SPSS19.0软件进行统计学分析。  [结果]  1.肺组织形态学观察:相同日龄,实验组大鼠肺组织RAC值均高于正常对照组大鼠,差异均有统计学意义(P<0.05)。相同日龄,实验组大鼠肺间隔亦较正常对照组薄。相同日龄,实验组大鼠肺发育程度较正常对照组大鼠成熟。  2.大鼠肺组织HIF-1α mRNA和蛋白表达水平:相同日龄,两组大鼠肺组织HIF-1α mRNA相对表达量无显著性差异(P>0.05),随着日龄增大,两组大鼠肺组织HIF-1αmRNA相对表达量整体均无显著性差异(P>0.05)。相同日龄,实验组大鼠肺组织HIF-1α表达量高于正常对照组大鼠,差异具有统计学意义(P<0.05),随着日龄增大,两组大鼠肺组织HIF-1α表达量整体均存在差异,差异具有统计学意义(P<0.05)。  3.大鼠肺组织VEGF mRNA和蛋白表达水平:相同日龄,实验组大鼠肺组织VEGF mRNA和蛋白表达量高于正常对照组大鼠,差异具有统计学意义(P<0.05)。随着日龄增大,两组大鼠肺组织VEGF mRNA和蛋白表达量整体均存在差异,差异具有统计学意义(P<0.05)。  [结论]  HIF-1可能通过VEGF介导,促进新生大鼠肺发育成熟。本实验对使用HIF-1治疗支气管肺发育不良作初步的探讨。
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