铜绿假单胞菌TBPY共代谢降解氯酚化合物的研究

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氯酚类化合物被广泛应用于防腐剂和消毒剂,并且是很难被降解的和易在环境中累积的一类毒性较大的持久性污染物。在氯酚处理方法中,由于生物学方法拥有相对低廉的成本和更少的二次污染的优势,使得其比物理和化学法引起了更多的关注。但是,由于其结构的稳定性,自然降解比较困难。微生物共代谢是处理难降解有机物的重要方式,论文探讨了铜绿假单胞菌TBPY共代谢处理氯酚的降解特性。1.借助Vis-UV分光光度计和高效液相色谱(HPLC)仪,对铜绿假单胞菌TBPY的生长与降解对氯苯酚的性能进行了研究。结果表明:通过逐步增加对氯苯酚浓度和转接代数的驯化后,TBPY菌株降解对氯苯酚的能力有了很大的提高,驯化能显著提高TBPY菌株的降解能力。TBPY可耐受150mg/l的对氯苯酚。该菌优化的降解条件为温度30℃、降解菌体处于对数期、培养基初始pH8.0、装液量为100mL、接种量1.0~2.0%;在该条件下,发酵1天后可使100mg/l的对氯苯酚的降解率达99%以上。2.初步探索了TBPY共代谢降解对氯苯酚的途径。通过UV-Vis、HPLC和LC-MS结合检测出对氯苯酚的中间产物有马来酰基乙酸和4-羧甲烯基-2-丁烯-4-内酯。并且,共代谢降解对氯苯酚过程中检测到儿茶酚1,2-双加氧酶的活性,说明对氯苯酚是通过邻位开环途径。另外,又初步考察了降解过程中对氯苯酚浓度出现回复的机理。3. TBPY菌体的形态驯化前后发生了很大变化,由菌体周边整齐、直或稍弯、两端钝圆的均匀杆状变为不均匀的卵圆、短杆和直杆状,几乎每个菌的形态都呈“花生”状,且菌体周边出现半透明的膜状物质,TBPY有很好的自我保护能力。另外,TBPY在不利生长的环境中表现出菌体聚集的自我保护行为。4.初步考察了TBPY耐受及降解2,4-DCP和2,4,6-TCP的能力。TBPY菌株最高可耐受2,4-DCP及2,4,6-TCP的浓度分别为75mg/l和175mg/l。在优化的TBPY降解对氯苯酚的条件下,初始浓度为50mg/l的2,4-DCP降解19d后浓度变为20.96mg/l,其降解率约为58.08%;初始浓度为100mg/l的2,4,6-TCP降解4d后浓度变为0.36mg/l,其降解率达到99%以上。
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