论文部分内容阅读
目的:了解双环醇作为一种细胞保护剂,除了对多种肝损伤具有明显的肝保护作用外,是否对化疗药所致的肿瘤细胞损伤亦具有同样的保护作用,为临床上化疗药和保肝药如何合理使用提供依据。方法:本研究拟采用细胞计数、噻唑蓝(MTT)比色法等研究双环醇联合化疗对人乳腺癌细胞株MCF-7、T47D等细胞株生长的影响,并采用流式细胞术并结合Western免疫印迹检测细胞凋亡及凋亡蛋白Bcl-2、Bax的变化,分析双环醇对紫杉醇所致乳腺癌细胞生长抑制和和诱导凋亡及凋亡蛋白Bcl-2、Bax等改变的影响。结果:倒置显微镜下观察细胞形态,MCF-7细胞对照组生长良好,呈不规则形,细胞长满整个视野,双环醇组细胞形态与对照组相似,细胞数略减少,紫杉醇4μg/ml和2μg/ml组细胞呈圆形,失去原有形态,死细胞数目明显增多,而紫杉醇高剂量组加双环醇组、紫杉醇低剂量组加双环醇组细胞亦变圆,但也有一些细胞趋向于正常MCF-7的形态,死细胞数与紫杉醇高剂量组和低剂量组相比略减少;T47D细胞对照组呈短梭形,双环醇组细胞形态、数目与对照组相似,紫杉醇高剂量组、低剂量组细胞形态变圆,死细胞较多,紫杉醇高剂量组加双环醇组、紫杉醇低剂量组加双环醇组细胞亦变圆,死细胞数与紫杉醇高剂量组和低剂量组相比略减少。MTT结果显示:双环醇对MCF-7、T47D乳腺癌细胞株的生长无促进作用,对MCF-7细胞则有较明显的抑制生长作用(P<0.05),对T47D无明显抑制作用(P>0.05);紫杉醇可明显抑制MCF-7、T47D乳腺癌细胞株的生长(P<0.05);双环醇对紫杉醇的抑制MCF-7、T47D细胞生长作用均无明显影响(P>0.05)。通过流式细胞仪Annexin V-FITC检测凋亡,紫杉醇可诱导MCF-7凋亡,并呈一定的剂量依赖性(P<0.05),紫杉醇2μg/ml和4μ/ml凋亡细胞百分率分别为57.6±16.8%和83.6±10.6%;双环醇对紫杉醇的诱导MCF-7细胞凋亡作用无明显影响(P>0.05)。Western免疫印迹显示:紫杉醇作用MCF-7细胞6h后,Bcl-2蛋白的表达较对照组增强(P<0.05),Bax蛋白的表达较对照组减弱(P<0.05),双坏醇对紫杉醇所致的MCF-7细胞凋亡调节蛋白Bcl-2的变化影响不大(P>0.05),使紫杉醇诱导的Bax的表达减弱(P<0.05)。结论:紫杉醇可明显抑制MCF-7、T47D乳腺癌细胞株的生长并诱导MCF-7凋亡(P<0.05);双环醇对紫杉醇所致抑制乳腺癌细胞生长及诱导凋亡等改变均无明显影响(P>0.05)。紫杉醇作用MCF-7细胞6h后,Bcl-2蛋白的表达较对照组增强(P<0.05),Bax蛋白的表达较对照组减弱(P<0.05),双环醇对紫杉醇所致的MCF-7细胞凋亡调节蛋白Bcl-2的变化影响不大(P>0.05),使紫杉醇诱导的Bax的表达减弱(P<0.05)。总之,双环醇对紫杉醇所致乳腺癌细胞生长抑制、诱导凋亡及凋亡蛋白Bcl-2、Bax等改变均无明显影响,有较好的安全性。