苎麻总黄酮的基因型差异及黄酮分离与检测工艺优化研究

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苎麻(Boehmeria nivea)为荨麻科苎麻属多年生草本植物,它是重要的纤维经济作物。但其纤维作为纺织原料,仅有占整个植株的4%左右被利用,约96%成为苎麻副产物被废弃,产生极大的浪费;现代医学研究发现,苎麻中的黄酮类化合物具有多种药理活性,本文对苎麻黄酮类化合物提取分离、纯化及其含量的基因型差异性开展研究,主要结果如下:1.本研究采用单因素实验、正交实验以及验证实验,比较研究了乙醇回流法、纤维素酶-乙醇回流法、超声波-乙醇提取法等3种方法提取分离苎麻的黄酮类化合物,从总黄酮提取率、提取效率、工艺经济成本等考虑,以超声波-乙醇提取法提取分离苎麻的黄酮类化合物最为经济有效。其中乙醇回流法最佳提取工艺参数:料液比为1:70,乙醇浓度为80%,提取时间为100rmin,提取温度为80℃,此时苎麻总黄酮平均提取率为3.75%。纤维素酶-乙醇回流法最佳提取工艺参数:纤维素酶用量为3mg,酶解pH=4.5,酶解时间为80min,酶解温度为50℃,此时苎麻总黄酮平均提取率为3.82%。超声波-乙醇提取法最佳提取工艺参数:料液比为1:35,超声功率为100W,超声时间为45min,超声温度为60℃,此时苎麻总黄酮平均提取率为4.21%。2.通过比较研究3种树脂AB-8、S-8、D4020的吸附与解吸性能,确定AB-8为纯化树脂;通过AB-8型树脂的静态吸附与解吸、动态吸附与解吸实验,优化确定AB-8型树脂最佳吸附与解吸参数为:上样液浓度为0.3mg/mL,上样液流速为0.2mL/min,上样液pH=6;洗脱液乙醇浓度95%,洗脱液流速3mL/min,洗脱液用量5BV。3.对20个苎麻不同品种(种质)不同生长期不同部位的苎麻总黄酮含量的动态分析研究表明:苎麻的总黄酮含量变异范围在0.209~4.748%之间,平均含量为1.42%,其中“城步本地麻”叶部总黄酮含量最高达4.748%,“耒阳铁丝麻”根总黄酮含量最低为0.336%。不同部位中以叶部的含量最高,平均为2.309%,根次之,平均为0.689%,茎最低,平均为0.634%。苎麻随着生育进程增加,总黄酮含量一般先增加再逐渐降低,其中以封行后的中期含量最高,平均为2.702%,以封行前的含量最低,平均为1.91%。将20个苎麻品种(种质)分成3类,其中高黄酮含量苎麻品种(种质)3个;中黄酮含量苎麻品种(种质)10个;低黄酮含量苎麻品种(种质)为7个。
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