4个血清miRNA的组合模型作为肾透明细胞癌诊断标志物的研究

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目的:肾癌是一种常见的泌尿系统恶性肿瘤,其最常见的组织学亚型是肾透明细胞癌(>80%)。肾癌患者常常因为诊断过晚、治疗手段有限而预后较差,因此,找出可于临床上运用的肾癌诊断标志物对改善患者预后具有重要意义。Micro RNA(mi RNA)是一类长度约19-25个核苷酸的单链非编码小RNA,许多研究表明,mi RNA在基因表达调控中发挥着重要作用,并与诸如感染、免疫系统疾病、内分泌系统疾病及癌症等许多疾病的发生有关。mi RNA还被证实参与了肿瘤的进展,在细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡中担当着重要角色。更重要的是,mi RNA可以在大多数体液中检测到,这表明了mi RNA临床上易于采集的简便性。由于mi RNA在肿瘤学中所展现的功能,它们被认为是癌症诊断、预后或治疗评估的潜力巨大的生物标志物。本研究的目的是探索血清mi RNA及其所构成的血清组合诊断模型作为诊断肾透明细胞癌的无创性生物标志物的潜力。方法:本研究总计分为三个阶段,分别为筛选集阶段、训练集阶段及验证集阶段。在筛选集阶段,通过实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-q PCR)检测了来自20例肾癌患者血清和12例健康对照组血清的30个mi RNA的表达情况,选择在两组间表达差异明显的mi RNA纳入下一阶段的分析。在训练集(30例肾癌患者血清和26例健康对照组)和验证集(73例肾癌患者血清和80例健康对照组血清)阶段,进一步得到了仍具有异常表达的目标mi RNA。通过逻辑回归方程将验证集所得的目标mi RNA进行组合,得到血清组合诊断模型,并应用受试者工作特征(ROC)曲线和ROC曲线下面积(AUC)来评估这些mi RNA和组合模型的诊断价值。最后应用生物信息学分析,探索模型中的mi RNA在肾癌发生发展中可能发挥的作用或介导的通路。结果:筛选集阶段的30个候选mi RNA中有6个mi RNA(mi R-17-5p、mi R-20a-5p、mi R-21-5p、mi R-150-5p、mi R-145-5p和mi R-146a-5p)在训练集阶段和验证集阶段的肾癌血清中皆有显著差异表达,其中4个mi RNA(mi R-145-5p、mi R-146a-5p、mi R-17-5p和mi R-20a-5p)表达水平显著低于正常对照血清,2个mi RNA(mi R-150-5p和mi R-21-5p)表达水平显著高于正常对照血清,结合临床数据分析显示mi R-150-5p在肾癌血清中的表达水平与肾癌的病理分级高度相关。ROC曲线表明,mi R-145-5p、mi R-146a-5p、mi R-150-5p和mi R-20a-5p拥有优异的诊断效能,其曲线下面积分别为0.827、0.785、0.717和0.704。运用逻辑回归分析方程将上述6个明显差异表达的mi RNA进行组合构建诊断模型,其中4个目标mi RNA(mi R-21-5p、mi R-150-5p、mi R-145-5p和mi R-146a-5p)入组,所构建的模型其曲线下面积高达0.938(95%置信区间:0.889-0.971;特异度:93.75%;敏感度:90.79%),表明其具有卓越的肾癌诊断能力。生物信息学分析提示这4个目标mi RNA靶向的基因可能参与了肾癌发生、发展的多个生物学进程。结论:以血清mi R-21-5p、mi R-150-5p、mi R-145-5p和mi R-146a-5p为组合构建的诊断模型对肾透明细胞癌有着卓越的诊断价值,有望成为肾透明细胞癌诊断的新型无创性生物标志物。
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