茶,是世界上最受欢迎的饮料之一,自古以来人们就开始饮用,而茶叶起初是作为药用。茶含有大量对人类健康有利的化学物质,如多酚、咖啡因、茶氨酸、多糖和其他化合物。大量的细胞培养和动物实验证明,绿茶和多酚具有不同的抗癌和治疗作用,其机制包括抗氧化活性的刺激。根据美国农业部(USDA)的类黄酮数据库,冲泡的绿茶平均每100 mL中含有126.6 mg儿茶素和77.8 mg EGCG,这是在1 g茶叶/100 mL冲泡的基础上得出的结论。大量试验结果研究表明,有机肥对茶叶中化学成分含量具有重要作用。因此,本研究以日照绿茶为试材,采用追肥方式。探究施用豆粕发酵肥后对茶园土壤理化性质、茶叶品质的影响,同时分析施用豆粕发酵肥后茶园土壤理化性质与茶叶中内含成分的相关性以及不同采收期茶叶中抗氧化活性的动态变化。并通过创建细胞氧化损伤模型,测定TP、茶氨酸和茶碱对细胞氧化损伤的水平。通过本试验为TP、茶氨酸和茶碱预防和治疗氟致神经损伤和肝脏疾病提供一些有价值的参考依据,及为施用豆粕肥提高茶叶中化学成分含量与本身具有的功能活性相互联系方面增添一些研究数据,可以进一步开发成相应的天然有效抗氧化剂产品。同时,向广大消费者和饮茶爱好者提供具有高含量茶多酚的茶叶。主要研究结果如下:(1)豆粕发酵肥对茶园土壤、茶树生长和茶叶品质的影响茶树的百芽重和萌芽密度是茶树生长的重要指标,是决定茶叶产量的重要因子。试验得出施用豆粕发酵肥对茶树新梢萌发率和百芽重有显著的提高效果,与对照组相比,试验组茶树中的百芽重在三个周期内测定的含量分别增加9.96%、14.63%、21.97%。对茶树百芽重的提高最佳。与对照组相比,试验组茶树中萌芽密度在三个周期内测定的含量分别增加20.30%、27.18%、29.16%。同时施用豆粕发酵肥能够显著提高茶园土壤pH、有机质、全氮、全磷和全钾;从茶多酚、游离氨基酸、咖啡碱、水浸出物、维生素类、儿茶素类和可溶性糖类的含量来看,试验表明在氮的条件下,施用豆粕发酵肥茶叶中水浸出物、游离氨基酸、维生素类、儿茶素类和可溶性糖类含量均显著增加,减少茶汤苦涩味,提高茶叶品质。探索茶园土壤理化性质与茶叶中内含成分的相关性分析表明,施用豆粕发酵肥后土壤全氮含量对茶叶内含成分含量的作用呈极显著相关(P<0.01),茶园土壤pH值对茶叶内含成分含量影响次之,其余过低,没有明显的作用。因此,施用豆粕发酵肥可改善茶园土壤理化性质,进而对提高茶叶品质具有重要的影响作用,为豆粕发酵肥在茶树上应用提供依据。(2)豆粕发酵肥对茶叶抗氧化活性的动态变化研究分别采用4种方法(Folin-ciocalteu试剂法、DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)自由基消除法、ABTS~+(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)diammonium salt)自由基清除法和铁离子还原/抗氧化能力法(Ferric ion reducing antioxidant power,FRAP)用于测定施用豆粕发酵肥和未施用豆粕发酵肥的茶叶在不同采收期抗氧化活性。试验结果表明,与对照组相比,施用豆粕发酵茶叶的多酚含量显著增加,呈现先升高后降低的趋势。分别以6,7月份含量最高,抗氧化能力最强;并均以9月份含量最低,抗氧化能力最差。测得不同采收期茶叶的抗氧化能力与多酚含量变化相同,进一步证明了多酚含量与抗氧化能力的正相关性,且多酚类物质是茶叶发挥抗氧化作用的主要成分。(3)TP、茶氨酸和茶碱对NaF诱导Neuro-2A细胞和HepaRG细胞的保护作用。以TP、茶氨酸和茶碱为试验材料,Neuro-2A细胞和HepaRG细胞为试验对象。建立氟化钠(NaF)诱导的Neuro-2A细胞和HepaRG细胞氧化损伤模型,并以不同浓度TP、茶氨酸和茶碱进行干预24 h,检测细胞存活率。结果表明,与对照组相比,4 mM NaF模型损伤组细胞存活率显著降低,当加入TP(0.5~40μg/mL)对Neuro-2A细胞进行预保护后,细胞存活率在90%~95%之间;6 mM茶氨酸和0.05 mM茶碱是显著提高NaF诱导Neuro-2A细胞存活率得重要浓度;0.5μg/mL TP、6~8 mM茶氨酸和0.1 mM~1mM茶碱是显著提高NaF诱导HepaRG细胞存活率的重要浓度。因此,本研究为TP、茶氨酸和茶碱的抗氧化活性研究提供了一定参考,为开发茶叶抗氧化产品提供理论依据。同时为探究TP对NaF诱导Neuro-2A细胞和HepaRG细胞氧化损伤的保护作用提供重要的理论和实践基础。(4)TP对NaF诱导Neuro-2A细胞氧化损伤的保护作用为探讨TP对NaF诱导Neuro-2A氧化损伤的保护作用,建立了TP干预下的NaF诱导的Neuro-2A细胞氧化损伤模型。通过检测并比较不同试验组的Neuro-2A细胞存活率、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,我们发现,与对照组相比,NaF损伤组的细胞存活率显著下降,为44.10%(P<0.05),当加入0.5~40μg/mL TP对细胞进行预干预后,NaF处理的细胞存活率恢复至90%~95%。此外,与对照组相比,NaF损伤组MDA含量显著上升,达到2.37μmol/mg(P<0.05),SOD和GSH-Px活性明显(P<0.05)下降,分别为45.25 U/mg和52.77 U/mg,而经TP预处理的Neuro-2A细胞在经NaF处理后MDA含量、SOD和GSH-Px活性与对照组相比无显著差异。研究结果表明,TP可通过减轻Neuro-2A细胞脂质氧化程度,降低胞内脂质过氧化物MDA含量来调节细胞的抗氧化/促氧化的动态平衡,发挥其对NaF诱导Neuro-2A细胞氧化损伤的保护作用。综上可知,TP预处理能减轻NaF对Neuro-2A细胞造成的氧化损伤,这为将其开发成天然高效的抗氧化剂产品及其合理利用提供了理论依据。综上所述,施用豆粕发酵肥可有效改善茶园土壤理化性质,能显著提高茶树百芽重和新梢萌发率,进而对提高茶叶品质具有重要的影响作用。并且对试验组绿茶抗氧化能力有显著的提高。进一步证明了多酚与抗氧化能力的相关性。通过细胞试验进一步探讨TP对NaF诱导Neuro-2A细胞和HepaRG细胞氧化损伤的保护作用,试验结果表明,TP可以通过减轻脂质氧化程度,降低脂质过氧化物MDA含量,发挥对NaF诱导Neuro-2A细胞氧化损伤的保护作用,使SOD与GSH-P_X活性升高,发挥了对Neuro-2A细胞的保护作用;同时,TP对NaF诱导HepaRG细胞有较强的预保护作用。因此,豆粕发酵肥是可作为有机肥料被茶农施用,提高茶叶中化学成分,即增加茶叶中茶多酚含量。供消费者饮用,增加人类身体健康,此外,长时间饮用起到清除自由基、防癌治癌、抗疲劳、抗辐射等功能。