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1.高尔基磷酸化蛋白2 (GOLPH2)与肺癌的相关性研究高尔基磷酸化蛋白2 (GOLPH2,又称为GP73或GOLM1),是近些年发现的一种高尔基体膜蛋白。研究表白该蛋白在很多疾病以及癌变组织中都有高表达,如Alzheimer和Wilson病;肝细胞癌(HCC)、前列腺癌、肾癌以及精原细胞瘤病变组织。目前,GOLPH2已被公认为是HCC有效的早期检测生物指标(biomarker)。但是,GOLPH2在肺癌中的表达状况目前还没有相关研究。本实验中,通过对178份肺癌病人的组织样本进行免疫组织化学半定量检测,系统的分析了GOLPH2在肺癌病人组织中的表达情况。同时,我们又运用夹心ELISA的方法定量比较了133份肺癌病人血清样本和70分健康人血清样本中的GOLPH2含量变化。免疫组织化学染色结果显示,所有肺腺癌组织样本(116份)均为强染色结果(100%),其中97份样本(83.6%)呈现胞质扩散染色。但在49份肺鳞癌病人组织样本中,只有8份样本(16.3%)为强染色,包括2份(4.1%)胞质扩散染色。统计结果表明,肺腺癌组织中的GOLPH2表达量显著高于其他类型肺癌中的GOLPH2表达量(P<0.001)。不同类型肺癌衍生细胞的western blot半定量实验进一步证实了GOLPH2确实在肺腺癌细胞中高表达。夹心ELISA对血清中GOLPH2浓度定量结果显示,133份肺癌病人血清中的GOLPH2的平均浓度为69ng/ml,而70份健康人血清中的GOLPH2的平均浓度仅为53ng/ml。综合结果,GOLPH2在肺腺癌肿瘤组织中高表达。肺癌病人血清GOLPH2含量想对于健康人高约30%。2. GOLPH2与肝癌的相关性研究高尔基磷酸化蛋白2 (GOLPH2,又称为GP73或GOLM1)是2000年发现的高尔基二型跨膜驻留蛋白,理论上不会分泌到细胞外。但研究发现,在肝病患者血清中能检测到GOLPH2,且恶化程度越高的病人,其血清中GOLPH2的浓度越高(例如,从急性肝炎到肝硬化)。即肝病患者病变细胞恶化程度越高,GOLPH2分泌的越多。这一结果提示我们,血清GOLPH2可能与癌变细胞的癌化程度呈正相关,进而可以通过监测血清中GOLPH2的含量来准确判定病人的癌化程度。但是以人为实验对象存在着局限性。而细胞系中不能观察长期效应,无法模拟和复制体内环境。在我们的研究,建立了人类肝癌细胞HepG2和Huh7的异体移植裸鼠模型。通过免疫组化实验观察异体移植瘤中GOLPH2的表达,以及通过夹心ELISA检测裸鼠血清中GOLPH2的浓度变化。实验结果显示,HepG2和Huh7均有分泌GOLPH2的能力。但HepG2异体移植的裸鼠模型血清中检测不到GOLPH2,而Huh7的可以检测到。比较HE染色结果,Huh7体内成瘤后可以异常促进血管的增生,而HepG2没有此现象。同时,对Huh7异体移植的裸鼠模型血清中GOLPH2检测结果显示,血清中GOLPH2的含量随着肿瘤的增大而增多。总而言之,GOLPH2能否分泌到血清中与血管增生密切相关。证实了血清中GOLPH2的含量和肿瘤大小成正相关,从一个侧面反映了血清GOLPH2可能与癌变细胞的癌化程度正相关。