气相色谱法及气/质联用法检测动物组织中氧化乐果的研究

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目的1、建立生物检材中氧化乐果的气相色谱和气相色谱/质谱检测方法;2、建立氧化乐果中毒致死动物模型,观察犬氧化乐果灌胃给药致死过程的生命体征;3、检测中毒致死犬各组织中氧化乐果含量,为氧化乐果中毒致死案件的检材采取、检测及法医学鉴定提供科学依据。方法1、样品的处理和气相色谱、气相色谱/质谱检测:血、组织样品中加入内标物马拉硫磷,加0.5mL 10%三氯醋酸沉淀蛋白,二氯甲烷萃取,气相色谱/质谱联用法定性,气相色谱内标法定量检测氧化乐果。2、氧化乐果在犬体内的含量检测:犬8只,经口灌胃给药14ml·kg-1,观察给药到死亡时的生命体征的变化以及中毒症状,待呼吸和心跳全部消失时,迅速解剖动物,取心血、心、肝、脾、肺、肾、骨骼肌、脑、胆汁、尿液等冷冻保存,沉淀蛋白后,二氯甲烷萃取,气相色谱质谱法定性、气相色谱定量检测氧化乐果。3、统计学方法:采用SPSS11.5统计软件处理数据,结果以均数±标准差(x±s)表示,t检验。结果1、症状犬在经口灌胃后出现中毒症状,给药后10-20min实验犬出现流涎,流泪,大小便失禁,呕吐,瞳孔缩小,痉挛,肌束震颤,呼吸困难至减弱或消失。实验犬平均在给药后36.63±16.87min死亡。2、氧化乐果在犬体内的含量实验犬体内氧化乐果的平均含量从高到低分别依次为:肝、心、肺、脑、骨骼肌、肾、脾、心血、尿液、胆汁。结论1、本文建立的生物检材中氧化乐果气相色谱/质谱检测方法选择性好,定性准确,气相色谱检测简便,快速,灵敏,定量结果准确,可用于氧化乐果中毒的临床快速检验诊断和氧化乐果中毒(死)案件的法医学鉴定。2、氧化乐果意外死亡和中毒案件进行法医学鉴定时,除常见检材胃组织及胃内容、心血外仍需采取肝、心、肺、脑等组织进行全面的农药定性和定量分析,并结合症状及体征发现进行综合判定。
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