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本试验以人肝癌细胞HepG2和成人正常肝细胞L02为研究对象,通过油酸诱导建立肝细胞脂肪变性模型,以蛹油多不饱和脂肪酸(Silkworm Pupa Oil Polyunsaturated Fatty Acid, SPO PUFAs)及其主要组成成分α-亚麻酸(a-Linolenic acid, ALA)为受试物,研究SPO PUFAs和ALA对HepG2和L02细胞的脂质积累及细胞内胆固醇代谢转化影响,并通过实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)及western-blot免疫蛋白印迹检测对细胞内胆固醇代谢调控相关基因LXRα、 PPARγ、 ABCA1、LXRα和CYP7A1 mRNA及相关蛋白表达的影响,揭示SPOPUFAs和ALA对HepG2和L02肝细胞胆固醇代谢调控的分子机制。研究结果如下：(1) SPO PUFAs和ALA可以抑制油酸诱导的L02和HepG2肝细胞内的脂质积累,经测定细胞内TC含量显著降低,而培养液中的胆汁酸(TBA)含量显著升高,且存在剂量依赖关系,表明SPO PUFAs和ALA可以促进肝细胞内胆固醇代谢转化为胆汁酸而排出细胞。(2)通过SPO PUFAs和ALA干预油酸诱导的肝细胞脂变过程,Real-Time PCR及western-blot检测结果表明,SPO PUFAs和ALA可以促进LXRα和PPARy基因及蛋白表达,进而上调其下游基因ABCA1、ABCG1及CYP7A1基因及蛋白表达,说明,SPO PUFAs和ALA促进肝细胞胆固醇代谢转化、抑制肝细胞脂变的分子机制可能是通过LXRa/PPARy-ABCA1/ABCG1-CYP7A1细胞信号通路实现的。(3)对比试验结果可以看出,蚕蛹油PUFAs较单一ALA促进胆固醇代谢转化的效果更好。(4)本试验采用的两种细胞,一个是正常人肝细胞L02,另一个是人肝癌细胞HepG2,证明两种细胞结果类似,均可用于食品功能因子对胆固醇代谢影响的相关研究。