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CUEDC2(CUE domain containing 2)，是一个包含CUE结构域的蛋白质，其生物学功能目前还不清楚。CUE结构域由约40个氨基酸组成，能与泛素结合，广泛存在于多种真核蛋白质中。CUE结构域与单泛素、多泛素均存在相互作用，且发挥不同功能。泛素化是调节蛋白质功能的一种重要形式，是细胞信号转导的重要调控机制。为了揭示CUEDC2的生物学功能，应用酵母双杂交筛选技术对CUEDC2相互作用蛋白质进行了筛选并对其功能进行了初步研究。我们以CUEDC2基因全长作为诱饵，从人乳腺cDNA文库中筛选与其相互作用的蛋白质。从185个候选克隆中筛选出7个阳性克隆与CUEDC2存在相互作用。测序结果表明，这7个克隆分别为四种基因来源：Homo sapiens THAPdomain containing，apoptosis associated protein 3(THAP3)；Homo sapiens suppressor of cytokine signaling 3(SOCS3)：Homo sapiens apoptosis associated protein，growth arrest and DNA damage-inducible gene 34(GADD34)；Homo sapiens IkB kinase-beta(IKK[3)。我们从人乳腺文库中钓取了这四种蛋白质的cDNA序列，为下一步的结构和功能研究做好准备。CUEDC2与四种蛋白质之间的相互作用随后通过体外的GSTpull—down实验和体内的免疫共沉淀实验得到了验证。
为进一步阐明CUEDC2的生物学功能，以酵母筛选结果为依据研究CUEDC2和GADD34相互作用的生物学意义。根据文献报道，GADD34能够促进p53转录激活活性，首先利用双荧光报告系统在真核细胞MCF-7中验证了GADD34对p53转录活性的促进作用。我们将CUEDC2单独转入MCF-7细胞，检测p53转录活性，结果发现，CUEDC2对p53活性无影响，但是CUEDC2与GADD34共转时，可以明显增强GADD34对p53活性的促进作用。发现CUEDC2在哺乳动物细胞中能够特异的增加GADD34蛋白质表达水平。提示CUEDC2可能通过与GADD34相互作用，促进GADD34蛋白质表达，从而影响GADD34对p53转录活性的促进能力。总之，实验表明，CUEDC2能够通过结合GADD34，并影响GADD34蛋白质表达水平，进而影响p53的活性。因此，本文所发现的CUEDC2和GADD34相互作用复合体可能为我们研究CUEDC2的生物学功能提供启示，进一步研究有可能发现CUEDC2参与调节信号转导的机制。