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鉴于粉虱危害的严重性及其抗药性问题的日趋严重,全世界都在寻找有效合理治理粉虱的方法。本研究鉴于座壳孢菌的优点以及我们已有的菌株贮备,本研究的目标主要有:(1)对本实验室现存具代表性的26座壳孢菌进行筛选并对所筛选出的菌株进行杀虫活性评价;(2)寻找能够促进所筛选出的菌株大量产孢的液固双相发酵条件;(3)对座壳孢菌的剂型、其制剂与化学农药混配使用以及安全性问题进行研究。菌株筛选及生防真菌杀虫活性评价本研究将所有供试菌株的孢子分别用含0.05%Tween-80的无菌水配制成107个孢子/mL的孢子悬浮液,喷雾式处理烟粉虱2龄幼虫,筛选出致病力最强的菌株。以同样的方法将所筛选出的菌株孢子分别配制成108、107、106、105和104个孢子/mL的孢子悬浮液,分别处理粉虱的各龄幼虫。实验结果表明多数座壳孢菌株皆可侵染粉虱类害虫。所筛选出的扁座壳孢菌FJSM菌株可以侵染烟粉虱的各龄幼虫,且在多数情况下,该菌都可以在烟粉虱尸体上产生孢子,形成完整生命周期。成虫及卵最难侵染,然而对于烟粉虱的3龄到1龄幼虫,该菌株在接种后都有很高的致死率,从93%到100%。对于所建模型,结果非常符合TDM模型,所建模型均不存在异质性,即它们能够无偏描述不同浓度处理下座壳孢FJSM与烟粉虱各龄幼虫间的互作关系。时间剂量效应、对该菌株的半致死剂量LD50和半致死时间 LT50及该菌对烟粉虱各龄幼虫的毒力表明FJSM菌株生物防治烟粉虱具有一定潜力。响应面效应法(RSM)优化液固双相发酵条件应用响应面法来寻找能够促进FJSM菌株菌丝大量生长及孢子大量产生的液固双相发酵条件。生长模型和产孢模型的响应效果较好,其确定系数R2分别为0.9336和0.9532。单因素筛选、PB实验、最陡爬坡实验以及中心组合实验结果揭示FJSM菌株菌丝生长所需培养基的最佳成分浓度为葡萄糖31.4g/L、维生素B6 11.5mg/L和MgS04·7H200.64g/L,理论菌丝干重为2.1524g/100mL培养基,其大量产孢所需培养基的最佳成分浓度为小米33.8g/L、K2HP041.11g/L和MgSO4·7H2O0.37g/L,其理论产孢量为5.1145×109个孢子/30mL培养基。为验证模型的准确性,应用上述因素的实验水平进行菌株的双相发酵,所得菌丝干重为2.1405 g/100mL培养基,接近于预测值;最大产孢量为5.9132×109个孢子/30mL培养基,产量高于预测值,这也证明了该模型的准确性及双相发酵系统的优越性。座壳孢菌剂型配方的筛选测定各种原料与座壳孢相容性及其功能,研究座壳孢菌的剂型,以提高该菌孢子的贮藏力及环境稳定性。获得该菌油剂、水油剂和悬浮剂三种剂型的配方。座壳孢菌水油剂与常用化学杀虫剂混配的相容性及其互作的杀虫效应采用萌发法测定粉虱常用化学杀虫剂与FJSM菌株的生物相容性,筛选出与FJSM菌株孢子相容性较好且较新型的化学农药进行菌药互作实验。供试化学杀虫剂与FJSM菌株的生物相容性存在较大差异,结果表明烯啶虫胺与联苯菊酯的相容性较好,且低剂量烯啶虫胺与座壳孢菌混用增效作用明显,杀虫率达到96%。安全性试验生物制剂的安全性一直是人们广泛关注和研究的热点和要点,其评价内容主要包括对环境及非靶生物是否存在潜在危害。用FJSM菌株及其制剂对小鼠进行急性经口试验,对大鼠进行急性经皮试验,在28d试验期中,动物体重增加,无死亡,这都说明FJSM菌株及其制剂属于低毒或实际无毒产品。鱼类安全试验结果也显示,在适于座壳孢菌生长及多途径感染等不利条件的影响下,FJSM菌株未对水生生物(金鱼)造成明显影响,并对皮肤、黏膜无刺激性。实验表明,座壳孢菌及其制剂安全无毒,具有开发应用价值。综上所述,本研究主要成果以及创新之处:一、建立时间-剂量-死亡率(TDM)模型对所筛选出的菌株进行杀虫活性评价;二、应用响应面法寻找能够促进FJSM菌株菌丝大量生长及孢子大量产生的液固双相发酵条件;三、对座壳孢菌孢子制剂做了初步研究;四、揭示了座壳孢菌与粉虱常用化学杀虫剂菌一药混用杀虫的互作效应;五、对座壳孢菌的安全性作了全面的测试,证明座壳孢菌FJSM及其制剂是安全无毒的,是一株具有开发应用价值的昆虫病原真菌。