柑桔是世界第一大水果,总产量1.2亿吨左右。2007年我国柑桔种植面积和产量均跃居世界第一。由柑桔衰退病毒(Citrus tristeza virus, CTV)引起的柑桔衰退病是世界范围内一种重要的病害,在我国分布也极为普遍。目前对该病的主要防治措施包括弱毒株交叉保护(Mild Strain Cross Protection, MSCP)技术来防治茎陷点型衰退病。本研究在锦橙植株预先嫁接接种CTV弱毒株CT11之后第7个月,使用褐色橘蚜(25头／株)进行CTV强毒株CT14拮抗接种试验。分别在拮抗接种15、30、45、60及90天后采用微量Trizol法抽提总RNA,同时在柑桔18S rRNA及nad5两个内参基因共同校正的基础上,运用real-time RT-PCR (real-time fluorescence quantitative RT-PCR,实时荧光定量RT-PCR)技术对供试植株体内CTV强弱毒株的含量变化进行监测。本研究结果将有助于揭示MSCP防治CTV的机理。主要研究结果如下：1)嫁接接种后6个月内弱毒株的p25基因在甜橙中表达的高峰期存在差异。随着时间和季节推移,CTV的量会出现波动过程。2)当25头蚜虫接种CTV强毒株CT14至两年生无毒锦橙实生苗(正对照)后15至60天,供试植株的叶／皮可陆续检测出CTV。整个拮抗试验中大多数植株皮中CTV含量比叶中的含量更高。然而蚜虫接种正对照的嫩梢时发现,一半植株中嫩叶比嫩皮更早检测到CTV,而且多数植株的嫩叶中CTV含量比皮更早达到高峰。但最终在大多数植株中CTV在皮中的含量高于叶中CTV的含量。3)预免疫植株在褐色桔蚜拮抗接种后十个月仍未能检测到强毒株CT14。表明在25头蚜虫攻毒压力下,弱毒株CT11能够有效的阻止强毒株CT14的侵入或增殖,对甜橙植株起到很好的保护效果。4)预免疫植株在拮抗接种45天内其多数样品内(10/14,7个植株的叶和皮)弱毒株CT11的相对表达量迅速升高,且高于负对照植株体内CT11的相对表达量。在45天后拮抗植株内CT11的含量有所下降或者与负对照差异不大。5) 18S rRNA和nad5内参基因的表达基本上稳定。两个内参分别校正后CT11的变化趋势基本一致。