【背景】m6A修饰是真核细胞mRNA最常见的转录后修饰之一,这个过程通常是:书写酶调节了癌基因或抑癌基因的信使RNA的m6A修饰,随后阅读酶识别并进一步调节基因的表达;同时,擦除酶将癌基因或抑癌基因的mRNA中m6A擦去,使阅读酶不能发挥其基于m6A修饰的分子生物学作用,从而达到调节癌基因或抑癌基因表达的目的。总之,m6A修饰系统中的书写酶、擦除酶和阅读酶共同动态调节m6A修饰水平,其可影响着mRNA稳定、剪接成熟与随后蛋白质的翻译等关键的细胞生物学过程。近年来,肿瘤相关基因（即癌基因或抑癌基因）的表达的调控方面的证据更加证实了m6A对肿瘤的发生与发展有着重要的影响。m6A修饰通过影响癌基因或抑癌基因的表达,进而影响着诸多癌症特征:维持增殖信号、逃避生长抑制、抵抗细胞死亡、诱导血管生成、激活入侵和转移、改变能量代谢与免疫逃避破坏等。分子生物学机制上,m6A修饰是转录后调控的重要环节,调控很多已知或未知的RNA是参与肿瘤进展的重要癌基因或抑癌基因,如SNAIL或p53。FBXW7作为类肿瘤发生发展中重要的抑癌基因,越来越多的研究聚焦其上游调控机制的探索。哺乳动物细胞内存在多种路径调控FBXW7,包括p53、Pin1、C/EBP-δ、hes5和micro RNA等。然而,FBXW7与m6A修饰系统的关键酶的关系,以及在肺癌中FBXW7的表达可能如何被m6A修饰所调节,这些问题是仍未被探索研究。【目的】1.探究肺腺癌细胞中FBXW7 mRNA的m6A修饰水平。2.探究METTL3在肺腺癌组织、细胞水平的表达情况及其与肺腺癌的预后相关性。3.探究“METTL3-FBXW7”轴对肺腺癌恶性表型的作用。4.探索METTL3影响肺腺癌发生与发展的分子生物学机制。【方法】1.通过进行MeRIP-qPCR实验分析FBXW7 mRNA m6A甲基化修饰水平,并通过TCGA数据库分析FBXW7与m6A修饰系统相关蛋白的相关性。2.利用慢病毒构建了METTL3过表达或敲减细胞的稳转株,研究METTL3在肺腺癌细胞中的功能。3.通过进行Western blotting实验分析METTL3对FBXW7蛋白表达的影响;4.通过进行免疫组织化学染色实验分析METTL3、FBXW7蛋白表达水平在肺腺癌组织与正常肺旁组织的相关性。5.通过进行Western blotting、CCK-8、细胞凋亡和裸鼠荷瘤实验研究“METTL3-FBXW7”轴对肺腺癌发生与发展的作用。6.使用公开的数据集评估了METTL3 mRNA表达与肺腺癌患者生存期之间的预后相关性。7.通过进行RT-PCR、Western blotting、RNA半衰期测定、蛋白质稳定性、荧光素酶报告基因和RIP实验分析METTL3对FBXW7蛋白表达的分子机制。【结果】1.肺腺癌细胞中FBXW7 mRNA均含有丰富的m6A修饰,肺腺癌中FXBW7的表达与大部分m6A修饰系统相关蛋白表达呈正相关关系。2.METTL3在肺腺癌细胞中过表达上调了FBXW7蛋白水平。3.正常肺旁组织中METTL3蛋白和FBXW7蛋白水平高于肺腺癌组织,FBXW7蛋白表达与METTL3蛋白表达水平呈正相关关系。4.METTL3促进了肺腺癌细胞中凋亡相关分子（cleaved caspase 3和Bax）的蛋白表达水平,同时抑制了FBXW7经典靶基因Mcl-1和c-Myc的蛋白表达水平。5.METTL3促进了肺腺癌细胞凋亡并阻碍了其增殖,METTL3 mRNA在肺腺癌中低表达且与较差的肺腺癌预后相关。6.FBXW7过表达挽救了因METTL3敲减而受损的体内与体外的抗肿瘤表型。7.METTL3通过促进FBXW7的翻译进而促进FBXW7蛋白水平的表达,而不影响FBXW7 mRNA半衰期及FBXW7蛋白稳定性。【结论】我们的发现证明,在蛋白水平上FBXW7表达与m6A修饰系统的书写酶METTL3表达正相关,并发挥了至关重要的肿瘤抑制功能。METTL3在肺腺癌组织中呈现低表达,可能扮演着抑癌基因的角色,其抑制了肺腺癌细胞的增殖并促进其凋亡。此外,METTL3增加了FBXW7 mRNA的CDS的m6A修饰,进而增强了肺腺癌中FBXW7的翻译。因此,本研究深入探究了METTL3介导的m6A修饰的抗癌作用,并揭示了其潜在的分子生物学调节机制,表明METTL3介导的FBXW7 mRNA的m6A修饰是预防和治疗肺腺癌的有希望的治疗策略。