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目的:探究川芎嗪(TMP)和丹参酮IIA(TanshinoneIIA)对SD大鼠心室肌细胞钠离子通道电流(INa)及其动力学特征的影响,并进一步探讨两种药物联合给予后通道电流及各动力学过程的变化。方法:室温下快速游离SD大鼠心脏,并迅速将其置于冰浴中,然后采用Langendorff主动脉逆向灌流酶解法获得单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录钠通道电流,以细胞外液灌流给药的方式观察不同剂量的TMP和Tanshinone IIA单独和联合应用前、后INa的变化,进而分析药物影响前后钠离子通道电流的相关动力学特征变化。结果:1.TMP对钠通道电流的影响。(1)TMP作用的浓度依赖性TMP能浓度依赖性地抑制INa。当TMP浓度低于20μM时,其对INa无显著影响,但当药物浓度大于50 μ时,随着药物浓度的增加,对电流的抑制作用也随之增强。其中,50μM和200μM的TMP使电流密度(INa-Peak)由给药前的(-81.32±3.28)pA/pF分别降为(-58.10±4.16)pA/pF 和(-35.65±3.23)pA/pF(P<0.01,n= 6)。(2)TMP对INa的电流-电压关系(I-V)曲线的影响在50～400μM浓度范围内,TMP能使INa的I-V曲线显著上移,但I-V曲线的轨迹变化趋势未发生变化。(3)TMP对INa激活动力学的影响在50～400 μM浓度范围内,TMP能使INa的激活曲线右移。50 μM和200 μM TMP使半数激活电压(V1/2-ac)由给药前的(-42.92±0.24)mV分别变为(-41.20±0.19)mV和(-37.69±0.17)mV(P>0.05,n=6)。即TMP对通道的激活动力学无显著影响。(4)TMP对INa失活动力学的影响在50～400μM浓度范围内,TMP能使INa的失活曲线左移。50μM和200μM的TMP使半数失活电压(V1/2-in)由给药前的(-57.71±0.21)mV 变为(-64.05±0.41)mV 和(-69.85±0.39)mV(P>0.05,n=6)。TMP对通道失活动力学无显著影响。(5)TMP对INa失活后恢复动力学的影响在50～400 μ浓度范围内,TMP使INa的失活后恢复曲线左移。50 μM和200 μM的TMP 使恢复时间(τ)由给药前的(20.88±1.59)ms 变为(18.65±1.38)ms 和(15.62±0.8)ms(P>0.05,n=6)。即TMP对通道的恢复动力学无显著影响。2.Tanshinone IIA对钠通道电流的影响。(1)Tanshinone IIA作用的浓度依赖性Tanshinone ⅡA能浓度依赖性地抑制INa。低于10 μM的Tanshinone ⅡA对INa无显著影响,但当浓度大于20 μM时,随着药物浓度的增加,Tanshinone ⅡA对INa的抑制作用逐渐增强,20 μM 和 80 μM 的 Tanshinone ⅡA 使 INa-Peak 由给药前的(-110.61±6.28)pA/pF 分别降为(-87.28±5.76)pA/pF 和(-54.53±3.15)pA/pF(P<0.01,n=6),呈显著的浓度依赖性抑制。(2)TanshinoneIIA对INa电流-电压关系(I-V)曲线的影响在20～160μM浓度范围内,TanshinoneIIA使INa的I-V曲线显著上移,但I-V曲线的轨迹变化趋势未发生变化。(3)Tanshinone IIA对INa激活动力学的影响在20～160 μM浓度范围内,Tanshinone ⅡA对INa激活曲线无显著影响。20 μM和80 μM的 Tanshinone ⅡA 使 V1/2-ac 由给药前的(-43.85±8.07)mV 分别变为(-43.95±2.44)mV 和(-43.99±0.79)mV(P>0.05,n=6),即TanshinoneⅡA对通道激活动力学特征无显著影响。(4)Tanshinone ⅡA对INa失活动力学的影响在20～160 μM浓度范围内,Tanshinone IIA使INa的失活曲线显著左移。20 μM和80μM 的 Tanshinone ⅡA 使 V1/2-in 由给药前的(-52.15±0.96)mV 分别变为(-64.87±0.99)mV 和(-75.71±0.75)mV(P<0.05,n=6)。即 Tanshinone ⅡA使V1/2-in向超极化方向移动,加快了通道失活。(5)Tanshinone ⅡA对INa失活后恢复动力学的影响在20～160 μM浓度范围内,TanshinoneⅡA使INa的失活后恢复曲线右移。20 μM和80 μM 的 Tanshinone ⅡA 使 τ 由给药前的(11.52±1.18)ms 变为(20.84±0.99)ms 和(30.81±1.01)ms(P<0.05,n=6)。即 Tanshinone ⅡA可延迟通道的恢复。3.TMP和Tanshinone ⅡA联合使用对钠通道电流的影响。(1)TMP和Tanshinone ⅡA共同作用的浓度依赖性联合给予TMP和Tanshinone ⅡA可浓度依赖性抑制INa。为了初步探讨药物联合应用后的效果及便于横向对照,设置了(20+50)μM、(40+100)μM、(80+200)μM 和(160+400)μM四个浓度组合,结果发现随浓度梯度的增加,药物对INa的抑制作用增强,(20+50)μM和(80+200)μM的 Tanshinone IIA+TMP 使 INa-Peak(-103.94±6.58)pA/pF 分别降为(-59.86±5.12)pA/pF和(-30.60±4.23)pA/pF(P<0.01,n= 6)。相比两药单独使用,联合应用时对INa的抑制率更高,如 50 μm的 TMP、20 μM 的 Tanshinone ⅡA 和(20+50))μM 的 Tanshinone ⅡA+TMP对的抑制率分别为(29.1±1.1)%、(19.1±1.1)%和(42.±1.4)%(P<0.05,n=6),突出了两种药物联合使用的优势。(2)TMP和Tanshinone ⅡA联合使用对INa电流-电压关系(I-V)曲线的影响Tanshinone ⅡA+TMP作用时同以上单独给药情况一样,可使INa的I-V曲线显著上移。(20+50)μM 和(80+200)μM 的 Tanshinone ⅡA+TMP 使 VPeak-30 mV 分别变为-25 mV 和-20 mV(P<0.01,n=6),但I-V曲线轨迹变化趋势未发生变化。(3)TMP和Tanshinone ⅡA联合使用对INa激活动力学的影响Tanshinone ⅡA+TMP使INa激活曲线右移,但无显著性影响。(20+50)μM和(80+200)μM的 Tanshinone ⅡA+TMP 使 V1/2-ac由(-42.74±0.43)mV 分别变为(-42.32±0.4)mV 和(-39.9±0.75)mV(P>0.05,n=6)。即TMP和Tanshinone ⅡA联合给予对通道激活动力学特征无显著影响。(4)TMP和Tanshinone ⅡA联合使用对INa失活动力学的影响Tanshinone ⅡA+TMP 使 INa 的失活曲线左移。(20+50)μM 和(80+200)μM 的 TanshinoneⅡA+TMP 使 V1/2-in 由(-81.61±0.72)mV 分别变为(-82.89±0.59)mV 和(-88.21±0.49)mV(P>0.05,n=6)。即TMP和Tanshinone ⅡA联合给予对通道失活动力学特征无显著影响。通过对比三种情况下V1/2-in的变化发现,两药联合给予对通道失活过程影响较小。(5)TMP和Tanshinone ⅡA联合使用对INa失活后恢复动力学的影响Tanshinone ⅡA+TMP 使 INa 的失活后恢复曲线右移。(20+50)μM 和(80+200)μM 的Tanshinone ⅡA+TMP 使 τ 由给药前的(20.47±0.84)ms 变为(30.22±0.97)ms 和(31.62±1.02)ms(P<0.05,n=6),即TMP和TanshinoneⅡA联合给予可延迟通道恢复。通过对比三种情况下τ的变化发现,联合给予组可逆转TMP对通道恢复的加快,同时相比Tanshinone ⅡA组,联合给予组对通道恢复过程影响较小。结论:川芎嗪和丹参酮ⅡA单独及联合应用时均可浓度依赖性抑制SD大鼠心室肌细胞钠通道电流,且两者联合应用后发挥的抑制作用更强,同时对通道激活、失活及失活后恢复动力学特征产生的影响较小。