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目的膀胱癌是我国泌尿外科最常见的肿瘤,膀胱表浅性癌(即非肌层浸润性膀胱癌)约占75%,经尿道膀胱肿瘤切除术是膀胱表浅性癌的主要治疗方法,但术后1年复发率最高达67%,术后均进行辅助性膀胱灌注治疗,化学药物灌注能降低肿瘤的复发率,但仍有10-30%左右患者会复发,寻找有效的膀胱灌注药物,是降低膀胱癌术后复发的一个关键环节。目前,临床上常规选用丝裂霉素、表阿霉素及阿霉素类、羟喜树碱作为膀胱灌洗药物,何种药物更具有优势还没有定论；相关文献报道了联合用药对膀胱肿瘤细胞的抑制率明显高于单一用药,何种药物组合疗效最好,还没有明确规范；尿路上皮癌是我国肾移植术后最常并发的恶性肿瘤,其中以膀胱癌为主,雷帕霉素不仅是一种新型抗移植免疫排斥反应药物,而且在抗肿瘤方面有重要作用,还未见有关雷帕霉素应用于普通膀胱癌治疗的报道。故此,本研究拟通过比较丝裂霉素、羟喜树碱、雷帕霉素及表阿霉素四种单药及其两两组合对体外培养的膀胱癌T24细胞的抑制作用强弱,筛选出抑制率最高的单药及药物组合；并对药物作用机制进行了初步研究；为今后临床上药物预防膀胱癌术后复发提供理论依据。方法体外培养人膀胱癌T24细胞,筛选最佳接种浓度。应用MTT实验并结合相关公式,得到四种单药的IC50值；以各单药IC50值为基础,作用膀胱癌T24细胞24及48小时,比较单药及其两两组合(全量及半量)对T24细胞的抑制率,得到抑制率最高的单药及药物组合；然后以选出的相关药物作用T24细胞后PI染色,流式细胞仪检测药物作用后的细胞周期变化情况；HE染色显示细胞凋亡情况。统计学分析应用SPSS软件,采用方差分析及SNK-q检验方法比较分析。结果T24细胞的最佳实验浓度为10×104个/ml。丝裂霉素、羟喜树碱、雷帕霉素及表阿霉素四种单药IC50值分别为12μg/ml、5μg/ml、125ng/ml、11μg/ml(最后实验所用)。四种单药(顺序同前)对T24细胞作用：(1)作用24小时抑制率分别为35.89%、12.92%、6.70%、49.28%,相互比较,抑制率最高的为表阿霉素,统计学有差别；(2)作用48小时的抑制率分别为86.08%、72.16%、41.39%、87.91%,相互比较,表阿霉素、丝裂霉素、羟喜树碱之间统计学无差别,三者都高于雷帕霉素的抑制率,统计学有差别；(3)各单药及其两两组合中24小时抑制率最高的是丝裂霉素与雷帕霉素组合,全量及半量组合抑制率分别为63.64%、73.68%,二者统计学无差别,且比单药表阿霉素的抑制率高,统计学有差别；(4)各单药及其两两组合中48小时抑制率丝裂霉素与雷帕霉素全量组合的抑制率最高、为98.53%,高于雷帕霉素及雷帕霉素与羟喜树碱半量组合(抑制率分别为41.39%、60.73%,二者统计学有差别,雷帕霉素最小)的抑制率,统计学有差别,除此以外其余各药及组合间比较抑制率无差别。流式细胞仪检测发现丝裂霉素、雷帕霉素及二者组合作用于T24细胞后细胞周期G1期比例分别为(顺序按丝裂霉素、雷帕霉素、全量组合、半量组合)65.46±0.16%、69.36±0.35%、53.37±0.51%、59.02±0.42%,雷帕霉素的细胞周期G1期比例高于其它的,统计学有差别。HE染色见药物作用于T24细胞后发生大量凋亡结论丝裂霉素、羟喜树碱、雷帕霉素及表阿霉素四种单药中以表阿霉素对膀胱癌T24细胞的抑制率最高。两两药物组合中以丝裂霉素与雷帕霉素组合对膀胱癌T24细胞的抑制率最高,且高于四种单药。将雷帕霉素应用于联合用药研究其对膀胱癌细胞的作用是本实验的创新点,为雷帕霉素应用于普通膀胱癌病人打下基础。