超声微泡联合尼卡地平对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ansonliu
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背景:越来越多动物实验及临床观察表明凋亡在心肌缺血再灌注损伤中起关键性作用。实验结果显示细胞内钙离子浓度升高可促使细胞凋亡,因此,本研究采用二氢吡啶类钙通道阻滞剂盐酸尼卡地平以观察其对缺血再灌注心肌细胞凋亡是否具有抑制作用,而超声微泡可利用超声的空化效应,靶向释放药物,增加局部药物浓度。而目前尚未见国内外关于两者联合作用是否能抑制缺血再灌注诱导心肌细胞凋亡的研究报道。目的:1.观察急性缺血再灌注诱导心肌细胞凋亡。2.观察盐酸尼卡地平以及超声微泡联合盐酸尼卡地平对急性缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响。3.探讨Bcl-2,Bax基因在急性缺血再灌注心肌细的表达,以及盐酸尼卡地平对其影响。方法:成年SD大鼠60只,随机分为6组,每组10只,即空白对照组、假手术组、缺血再灌注组、单纯尼卡地平治疗组、单纯超声微泡治疗组和超声微泡-尼卡地平联合治疗组。结扎左冠状动脉前降支建立在体大鼠心肌缺血再灌注模型。采用TUNEL法检测凋亡心肌细胞,SABC免疫组化法检测Bcl-2, Bax蛋白的表达,利用光学显微镜观察,并利用图象分析系统测量阳性表达区域平均光密度值,进行定量分析。并用完全随机对照方差分析分析数据。结果:(1)心肌细胞凋亡的改变:各组均可见心肌细胞凋亡,缺血再灌注组明显增高,差异具有统计学意义,(P<0.05);单纯超声微泡治疗组与缺血再灌注组差异无统计学意义(P>0.05);尼卡地平治疗组治疗组、联合治疗组差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)Bcl-2蛋白表达的改变:与对照组相比,各处理组Bcl-2蛋白表达增高,治疗组较缺血再灌注组更高,差异有显著性(P<0.05),组间有显著性差异(P<0.05)。(3)Bax蛋白表达的改变:与对照组相比,各处理组Bax蛋白表达增高,缺血再灌注组较治疗组更高,差异有显著性(P<0.05),组间有显著性差异(P<0.05)。结论:(1)缺血再灌注可以诱导心肌细胞凋亡的发生,尼卡地平可减少心肌细胞凋亡的发生,其保护作用可能部分与上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,升高Bcl-2/Bax比值有关。)(2)单纯超声微泡不能减少凋亡发生,但联合应用可增强尼卡地平作用,其机制可能与增加局部药物浓度有关。
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