手性是自然界中的普遍特性,具有不同构型的手性药物往往具有不同的药理和生理活性,对其单一对映体进行拆分是药物分析领域的重要内容。氨基酸是构成维持生命体生命活动的蛋白质、酶的基本单元,自然界中多为α-氨基酸,β-氨基酸虽然存在较少,但因其具有特殊的药理和生物活性而日益受到关注。人工合成的β-氨基酸多为外消旋体,欲获得单一构型的对映体必须对其进行手性拆分。本工作比较了两种手性配体交换色谱固定相的制备方法,利用手性高效液相色谱对β-氨基酸对映体进行了手性分离,优化了色谱分离条件,并探索了以β-苯丙氨酸作为选择子的新型手性配体固定相的制备方法。首先比较了三种制备手性配体交换固定相的方法——“一步”法、“气固相”法和“溶液”法。结果表明“一步”法键合量最高,对β-氨基酸的拆分效果最好。“气固相”法虽然在键合量和拆分效果上与传统的“溶液”法接近,但其制备过程中反应时间短,对环境友好,值得进一步对其进行系统的研究。进而以“一步”法制备的手性配体交换填料为固定相,系统地考察了中心金属离子浓度、缓冲盐浓度、流动相阴离子组成、流动相pH值和流速等流动相条件对β-氨基酸拆分的影响。建立了β-氨基酸拆分的最佳色谱条件:0.5 mmol/L CuSO4-20 mmol/L KH2PO4,pH=4.70,流速为1.0 mL/min。在此基础上,进一步合成了以β-苯丙氨酸作为选择子的手性配体交换固定相,装填色谱柱后,成功地拆分了α-对氯苯甘氨酸和β-苯丙氨酸,此方面的工作还未见相关的报道。