论文部分内容阅读
荜澄茄、干姜和辛夷是挥发油含量较高的中药；雪上一枝蒿总碱(主含雪上一枝蒿甲素)和乌头碱是常见的有镇痛作用的生物碱，单独应用皮肤透过量均较低。本论文主要考察了荜澄茄、干姜和辛夷挥发油对雪上一枝蒿总碱、雪上一枝蒿甲素、乌头碱经小鼠和裸鼠皮肤渗透的影响。主要研究内容如下：1.挥发油的提取及测定采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，并通过GC-MS鉴别其成分并测定含量。结果表明荜澄茄挥发油收率为1.43％(ml/g)，检出51种化合物，主成份为香叶醛(19.66％)、橙花醛(15.27％)；干姜挥发油收率为0.8％(ml/g)，检出69种化合物，主成份为α-姜烯(28.29％)；辛夷挥发油收率为1.59％(ml/g)，检出53种化合物，主成份为β-蒎烯(12.64％)。2.荜澄茄、干姜和辛夷挥发油体外促透皮作用 (1)对雪上一枝蒿总碱的促透效果考察分别采用改良的Franz扩散池进行体外透皮实验，以氮酮为对照，以HPLC(高效液相色谱法)测定雪上一枝蒿甲素的含量，考察1％、3％、5％、7％4种浓度的挥发油对雪上一枝蒿总碱的促透效果。结果表明同系列中3％氮酮、5％荜澄茄油、7％干姜油、7％辛夷油对雪上一枝蒿总碱的促透效果较好。以小鼠皮肤为透皮屏障时，3％氮酮、5％荜澄茄油、7％干姜油、7％辛夷油对30 mg/ml雪上一枝蒿总碱的12h平均累积渗透量分别为1355.4，1967.7，1383.4，1299.2 μg/cm2；6h增渗倍数分别为1.06，1.73，1.18，1.09。以裸鼠皮肤为透皮屏障时，24h平均累积渗透量分别为1836.7，2073.5，1821.2，1972.1 μg/cm2；6h增渗倍数分别为1.94，3.35，2.64，3.34，可见3种挥发油对雪上一枝蒿总碱的促渗效果比氮酮更好，3种挥发油在裸鼠皮肤上比小鼠皮肤促透效果更明显。(2)对雪上一枝蒿甲素的促透效果考察结果表明，以裸鼠皮肤为透皮屏障时，3％氮酮、5％荜澄茄油、7％干姜油、7％辛夷油对7 mg/ml雪上一枝蒿甲素的24h平均累积渗透量分别为2261.9，2811.9，2293.2，2605.1 μg/cm2；12h增渗倍数分别为6.02，6.04，5.12，7.58。不加促透剂时，雪上一枝蒿甲素12h透皮速率28.60μg/cm2.h小于雪上一枝蒿总碱67.08μg/cm2.h，而加入3种挥发油后，雪上一枝蒿甲素的12h透皮速率(217.01，146.70，172.87μg/cm2.h)大于雪上一枝蒿总碱(156.01，138.17，153.68μg/cm2.h)。(3)对乌头碱的促透效果考察考察了1％、3％、5％、7％、10％5种浓度的挥发油对乌头碱的促透效果。结果表明同系列中3％氮酮、7％荜澄茄油、7％干姜油、7％辛夷油对乌头碱的促透效果较好。以小鼠皮肤为透皮屏障时，3％氮酮、7％荜澄茄油、7％干姜油、7％辛夷油对12mg/ml乌头碱的12h平均累积渗透量分别为601.4，1549.3，874.0，888.3μg/cm2；12h增渗倍数分别为1.40，3.87，2.11，2.18。以裸鼠皮肤为透皮屏障时，12h平均累积渗透量分别为1643.1，3329.1，2108.3，1843.5μg/cm2；12h增渗倍数分别为8.34，15.25，9.99，8.21。表明3种挥发油均能明显促进乌头碱的透皮吸收。(4)荜澄茄挥发油中主成分柠檬醛的促透效果考察考察了柠檬醛对雪上一枝蒿甲素、乌头碱体外经裸鼠皮肤渗透的影响，结果表明3％氮酮、2％、5％柠檬醛对7mg/ml雪上一枝蒿甲素的24h平均累积渗透量分别为1766.3，835.0，2394.8μg/cm2；12h增渗倍数分别为4.02，1.45，5.85。3％氮酮、2.5％、7％柠檬醛对12mg/ml乌头碱的24h平均累积渗透量为1183.2，1212.6，1538.2μg/cm2；12h增渗倍数分别为4.24，3.94，4.89。可见，柠檬醛能促进雪上一枝蒿甲素、乌头碱的透皮吸收，但是促透效果不如荜澄茄挥发油。3.4种生物碱油水分配系数的测定采用HPLC法，测定雪上一枝蒿甲素、乌头碱、大黄藤素、颅痛定四种生物碱的正辛醇/水分配系数。结果油水分配系数为雪上一枝蒿甲素(29)>乌头碱(21.73)>成盐后雪上一枝蒿甲素(0.648)，乌头碱的透皮速率常数1.44(×10-3cm/h)<成盐后雪上一枝蒿甲素4.09(×10-3cm/h)；颅痛定油水分配系数PH7(315.31)>PH10(270.3)>PH8(239.35)>PH6(116.3)>PH4(16.43)；大黄藤素在pH 4～10的范围内，油水分配系数值和透皮速率均相差不大。提示油水分配系数可能是影响透皮速率常数的一个方面。
4.3种挥发油促渗机理的研究采用差示扫描量热分析方法(DSC)研究3种挥发油促透皮吸收机理。结果显示与未经处理的角质层相比，除类脂角质层、氮酮处理后的角质层与经3种挥发油处理后的角质层吸热峰均有所变化，提示3种挥发油的促透机理可能与瓦解角质层的双分子脂质层的紧密结构，流度增加有关。采用扫描电镜进一步对小鼠皮肤表面的超微结构观察，进一步证实了3种挥发油对双分子脂质层的影响。皮肤表面不连续性及裂隙的增加和毛囊口的拓宽，挥发油对皮肤有脱水作用，氮酮表现为亲水膨胀作用，提示3种挥发油对角质层类脂质具有特异的溶解作用，从而使屏障阻力降低，药物渗透速率增加。