紫大薯花青素提取及抗氧化研究

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天然抗氧化剂有着效果显著且副作用小的优点,花青素作为一种天然抗氧化剂成为许多人研究的焦点。经研究表明,花青素拥有较强的抗氧化能力,长期摄入花青素可以有效降低糖尿病、肥胖症等代谢性疾病的患病风险。本次试验采用海南紫大薯为原材料,优化花青素提取纯化步骤,确定花青素组成成分及相对比例,并进一步研究花青素在体内外试验中抗氧化能力,为海南紫大薯生物资源有效合理应用提供理论依据。主要研究内容如下:试验一通过超声辅助法提取海南紫大薯花青素,得到紫大薯花青素粗提液。采用分光光度法、p H示差法、液相色谱法三种方法测定花青素粗提液中总花青素含量,结果分别为32.75±0.38 mg/L,28.19±0.54 mg/L,27.94±0.78 mg/L。根据试验结果,本文总花青素的检测采用结果p H示差法。试验二基于超声辅助提取法对紫大薯花青素提取方法进行优化。分析提取过程中料液比、提取液中盐酸体积分数、超声时间的最佳条件,并结合响应面模型综合分析。结果表明:紫大薯花青素最佳提取条件是料液比为1:22(g/m L)、盐酸体积分数为0.63%、超声时间为19 min,最佳提取量为93.62 mg/100 g,提取量相比优化前有了明显提升。试验三纯化分析试验二中得到的紫大薯花青素粗提液,AB-8大孔树脂最佳条件为上样p H为3.0,上样流速为2.0 m L/min;解吸液乙醇浓度为60%,解吸液流速为2.0 m L/min。粗提液经过AB-8大孔树脂、固相萃取小柱及LH-20葡聚糖凝胶纯化,花青素纯度提高到81.08%。经鉴定分析,得到紫大薯花青素主要成分为矮牵牛素-3-O-阿魏酰基葡萄糖苷-5-O-葡萄糖苷,占总花青素的较大比例(76.77%)。试验四在前期基础上,检测紫大薯花青素抗氧化能力。在三项体外抗氧化能力测试中,紫大薯花青素纯化物抗氧化能力均大于抗坏血酸(Vitamin C,VC),表现出良好的抗氧化能力。体内抗氧化能力试验采用36只脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导氧化应激的C57BL/6雄性小鼠为试验动物,试验分为空白对照组、模型组、试验组,并利用试剂盒测定小鼠血清抗氧化能力。结果表明紫大薯花青素可以有效缓解LPS胁迫下小鼠的氧化应激反应。综上所述,紫大薯花青素纯化后在体外体内均具有较强的抗氧化能力,具有广阔的开发前景。
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